2009-09-08
org.kosen.entty.User@7ac0b0ae
송보경(benedula)
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sephadex를 이용하여 목적 물질을 분리하고 있는데, 처음 사용해봐서 모르는게 많습니다.
특히, sephadex는 고가로 알고 있는데 세척하여 3-4회 정도 재사용 가능하다고 알고 있습니다. 저는 sephadex LH-20을 오픈 컬럼에 충진하여 사용하고 있습니다.
1)어떻게 세척하여 재사용하는지 궁금합니다.
2)컬럼관이 좁을 수록 길수록 분리가 잘된다고 하는데, 이는 샘플의 로딩양과는 무관한지요?
- sephadex
- 세척방법
- sephadex LH-20
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답변 3
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답변
김범수님의 답변
2010-01-11- 2
>sephadex를 이용하여 목적 물질을 분리하고 있는데, 처음 사용해봐서 모르는게 많습니다. >특히, sephadex는 고가로 알고 있는데 세척하여 3-4회 정도 재사용 가능하다고 알고 있습니다. 저는 sephadex LH-20을 오픈 컬럼에 충진하여 사용하고 있습니다. >1)어떻게 세척하여 재사용하는지 궁금합니다. >2)컬럼관이 좁을 수록 길수록 분리가 잘된다고 하는데, 이는 샘플의 로딩양과는 무관한지요? sephadex는 PBS buffer로 수회 세척하고 보관하면 1년이상 사용가능합니다. -
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이상후님의 답변
2009-09-08- 1
>sephadex를 이용하여 목적 물질을 분리하고 있는데, 처음 사용해봐서 모르는게 많습니다. >특히, sephadex는 고가로 알고 있는데 세척하여 3-4회 정도 재사용 가능하다고 알고 있습니다. 저는 sephadex LH-20을 오픈 컬럼에 충진하여 사용하고 있습니다. >1)어떻게 세척하여 재사용하는지 궁금합니다. >2)컬럼관이 좁을 수록 길수록 분리가 잘된다고 하는데, 이는 샘플의 로딩양과는 무관한지요? Sephadex는 washing같은 유지,관리만 잘하면 상당기간(1년 이상) 사용할 수 있습니다. 1) 리사이클링은 사용하고자 하는 mobile phase가 물 일 경우, 물로 suspension시킨 후에, 정치시키고 상부에 부유된 부유물들을 제거해주는 과정을 수 회 반복하면 됩니다. Mobile phase가 버퍼일 경우에는, 버퍼로 같은 스텝을 반복해 주면 됩니다. 이용하면서 보관중에 이끼(moss)같은 물질이 생길 수가 있습니다. 이럴 경우에는 sodium azide같은 일종의 antiseptic을 일정량 첨가해서 보관하면 장기간 사용할 수 있습니다. 2) 샘플의 로딩량은 이론적으로 void volumn의 1-2%정도이긴 하나 실제적으로는 0.5%미만이 가장 적합 합니다. 또한 로딩량이 많아지게 되면 diffusion이 증가해서 resolution이 안 좋아지게 됩니다. -
답변
안길홍님의 답변
2010-01-25- 0
첨부파일
>sephadex를 이용하여 목적 물질을 분리하고 있는데, 처음 사용해봐서 모르는게 많습니다. >특히, sephadex는 고가로 알고 있는데 세척하여 3-4회 정도 재사용 가능하다고 알고 있습니다. 저는 sephadex LH-20을 오픈 컬럼에 충진하여 사용하고 있습니다. >1)어떻게 세척하여 재사용하는지 궁금합니다. >2)컬럼관이 좁을 수록 길수록 분리가 잘된다고 하는데, 이는 샘플의 로딩양과는 무관한지요? 참고자료