2009-09-24
org.kosen.entty.User@2f37b0f3
안민실(amsil)
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sjsjj님 정말 감사드립니다. 직접 여쭤보고 싶었는데 방법이 없어서 다시 글 올렸었거든요.
넘 반갑고 고맙습니다.
GABA분석방법은 시료 에 메탄올 가한 후 건고시켜 70mM Lacl3 1ml 가한 후 원심분리하
여 상등액 채취하여 0.1M KOH를 넣고 상등액 추출 후 0.5M K4P2O7용액과 4mM용액,
2.0unit Gabase용액 50ul혼합 후 여기에 20mM alpha-ketoglutarate 용액 50ul가하
여 실온 방치 후 흡광도 측정하는 방법을 이용하려고 하구요
시약은 alpha-ketoglutarate dehydrogenase 20unit(0.28unit/mg, 7.36ml)를 20mM
용액으로 희석사용하고자 합니다.
그리고 지난번에 답해주셨던 Gabase 10unit 을 2.0unit 희석할 때도 용매는 무엇으로
해야하나요?
제가 너무 너무 모르죠? 답답하시겠지만 완전 기초부터 잘 알려주세요.
부탁드릴께요
- GABA
- alpha-ketoglutarate dehydrogenase
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 1
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답변
장성재님의 답변
2009-09-24- 0
님께서 언급하신 GABA 분석법에서 사용하는 시약에는 20mM의 alpha-ketoglutarate를 사용하시는 것 같은데, 왜 alpha-ketoglutarate dehydrogenase를 20mM로 사용하려고 하시는지요? 시험법에서 약간 착오가 있으신 것 같습니다. GABASE Assay Method를 첨부하오니 참고하시길 바랍니다. 준비하실 시약 및 용매, 그리고 반응시의 buffer 등이 자세하게 언급되어 있으니 도움이 되실 것으로 생각합니다. >sjsjj님 정말 감사드립니다. 직접 여쭤보고 싶었는데 방법이 없어서 다시 글 올렸었거든요. > >넘 반갑고 고맙습니다. > >GABA분석방법은 시료 에 메탄올 가한 후 건고시켜 70mM Lacl3 1ml 가한 후 원심분리하 > >여 상등액 채취하여 0.1M KOH를 넣고 상등액 추출 후 0.5M K4P2O7용액과 4mM용액, > >2.0unit Gabase용액 50ul혼합 후 여기에 20mM alpha-ketoglutarate 용액 50ul가하 > >여 실온 방치 후 흡광도 측정하는 방법을 이용하려고 하구요 > >시약은 alpha-ketoglutarate dehydrogenase 20unit(0.28unit/mg, 7.36ml)를 20mM > >용액으로 희석사용하고자 합니다. > >그리고 지난번에 답해주셨던 Gabase 10unit 을 2.0unit 희석할 때도 용매는 무엇으로 > >해야하나요? > >제가 너무 너무 모르죠? 답답하시겠지만 완전 기초부터 잘 알려주세요. > >부탁드릴께요 >