2009-10-14
org.kosen.entty.User@4b442ece
한태원(korea498)
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피톤치드를 가지고 Agar diffusion test를 하려고 하는데
제가 보유중인 피톤치드가 물에 녹지 않아서 희석을 하지 못합니다.
ADT에 영향을 주지 않고 피톤치드를 희석할 수 있는 방법이 궁금합니다.
또 cell line을 통해 cell viability 실험도 하려 하는데, 세포독성이 없는
유화제나 피톤치드를 희석할 수 있는 방법도 알고 싶습니다.
- 피톤치드
- 에센셜 오일
- ADT
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 4
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답변
장성재님의 답변
2009-10-14- 2
Phytoncide은 식물에서 추출한 essential oils을 지칭하며, 항균 활성을 미롯하여 많은 생물,생리학적 활성을 가진 것으로 보고되고 있습니다. 생리활성물질들도 비수용성 (지용성)인 경우가 많습니다. 또한, 매우 미세한 농도에서 활성을 보이는 것들이 많이 있지요. 이와 유사한 개념으로 essential oil의 경우도 비독성 유기용매 (Ethanol, DMSO 등)를 사용하셔서 희석하시면 무방할 것으로 보입니다. 제가 몇몇 관련 논문을 검색해보니 우선 ADT에 사용하실 때에는 paper disc 등에 essential oil 원액을 loading해 주신 후 실험을 해보시길 바랍니다. essential oil이 paper disc 주위로 확산에 의한 자동적인 농도 구배를 형성하여 clear zone의 형성을 확인하실 수 있을 것입니다. 농도를 낮게 변경하시려면 일반적인 유기용매인 에탄올을 이용하여 희석하신 후 paper disc를 건조한 후 사용하실 수도 있습니다. 또한, 세포 독성 시험의 경우에도 DMSO 등의 일반적으로 세포를 이용한 실험에 많이 사용하는 유기용매를 사용하셔서 일정 농도 (stock solution)까지 희석하신 후에 세포 배양용 배지를 이용하여 최종 희석하셔서 사용하시면 무방할 듯 싶습니다. 물론 비교시험군으로 DMSO 등의 유기용매만을 동일 농도로 사용하셔야 합니다. 다양한 essential oil들을 이용한 실험 결과들이 있으므로, 직접 연구 논문 (참고문헌)을 검색해 보실 것을 추천합니다. >피톤치드를 가지고 Agar diffusion test를 하려고 하는데 > >제가 보유중인 피톤치드가 물에 녹지 않아서 희석을 하지 못합니다. > >ADT에 영향을 주지 않고 피톤치드를 희석할 수 있는 방법이 궁금합니다. > >또 cell line을 통해 cell viability 실험도 하려 하는데, 세포독성이 없는 > >유화제나 피톤치드를 희석할 수 있는 방법도 알고 싶습니다. -
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장성재님의 답변
2009-10-14- 2
님께서 대상으로 하시는 essential oil이 어느 정도의 농도에서 생리활성을 나타내는 지가 중요합니다. DMSO에 녹지않는다고 하셨는데 용해도가 어떻게 되는지 조사하셨나요? 앞서 말씀드렸듯이 에탄올에 녹는다면 고농도의 stock sol.을 제조한 후에 세포 실험을 위한 배지에 희석하셔서 사용하실 수 있습니다.에탄올의 영향을 최소화한 상태로, 물론 비교실험은 하셔야 합니다. 배지의 성분에는 각종 아미노산과 FBS 등이 surfactant의 역할을 하여 비수용성 물질을 녹여주는 역할을 합니다. 유사한 경우로 BSA (bovine serum albumin)를 일정 농도로 사용하여 lipids 등의 carrier로 사용하기도 합니다. 또한, 대부분의 emusifier나 유기용매의 경우 세포에 대한 독성을 나타내므로, 고농도를 원하실 경우 sonication 등을 이용하여 emulsion 상태로 상을 변형시킨 후 처리해 줄 수도 있을 것 같군요. 동물실험에 사용하신다고 하셨는데, 동물실험에 사용하실 때에는 administration route에 따라서 제형을 변형시키실 수 있습니다. Phytoncide의 논문을 검색해 보니 대부분이 에어로졸 형태를 사용하였더군요. >피톤치드를 가지고 Agar diffusion test를 하려고 하는데 > >제가 보유중인 피톤치드가 물에 녹지 않아서 희석을 하지 못합니다. > >ADT에 영향을 주지 않고 피톤치드를 희석할 수 있는 방법이 궁금합니다. > >또 cell line을 통해 cell viability 실험도 하려 하는데, 세포독성이 없는 > >유화제나 피톤치드를 희석할 수 있는 방법도 알고 싶습니다. -
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안길홍님의 답변
2009-10-14- 2
피톤치드를 물과 희석할려면 HCl이 첨가되어야 하는데, 아마 염산에 의하여 실험에 영향을 받으므로 이는 제외하고, 만일 레몬즙(슈퍼에 판매)을 사용하여도 실험에 지장이 없다면 소량 사용하여 보세요. 레몬즙의 pH가 아마 3~4정도 될것입니다. pH를 측정하여 보시고 실험에 이상이 없는 범위로 조정하시기 바랍니다. -
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이상후님의 답변
2010-01-25- 0
>피톤치드를 가지고 Agar diffusion test를 하려고 하는데 > >제가 보유중인 피톤치드가 물에 녹지 않아서 희석을 하지 못합니다. > >ADT에 영향을 주지 않고 피톤치드를 희석할 수 있는 방법이 궁금합니다. > >또 cell line을 통해 cell viability 실험도 하려 하는데, 세포독성이 없는 > >유화제나 피톤치드를 희석할 수 있는 방법도 알고 싶습니다. SDS나 caster oil에 dispersion시켜서 녹여보는건 어떨까요..
DMSO에도 녹지 않습니다. 에탄올에는 녹지만, 세포독성 후에 동물실험에도 이용하려고 해서 에탄올은 피하고 있구요. essential oil 실험논문을 봐도 희석했다고만 되어있지 대부분 어디에 희석되어있는지 자세히는 나와있지가 않아서요..