2010-01-06
org.kosen.entty.User@4c80731e
정윤석(tjrvtjr)
- 4
HPLC를 이용하여 azithromycin 분석해보신분?
검량선을 만들려고 제가 논문에 나와있는데로 이동상을 만들어서 LC를 돌렸는데
도저히 분석이 안되네요.
예상되는 시간에 peak가 나오질 않고 azithromycin이라 예상되는 peak를 농도별로 보면
area 값이 차이가 없고...
다른 약물들은 잘만 되는데 azi만 잘 안되네요.
뭐가 문제인지도 모르겠어요..
- azithromycin
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답변 4
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답변
이상후님의 답변
2010-01-06- 2
>HPLC를 이용하여 azithromycin 분석해보신분? > >검량선을 만들려고 제가 논문에 나와있는데로 이동상을 만들어서 LC를 돌렸는데 > >도저히 분석이 안되네요. > >예상되는 시간에 peak가 나오질 않고 azithromycin이라 예상되는 peak를 농도별로 보면 > >area 값이 차이가 없고... > >다른 약물들은 잘만 되는데 azi만 잘 안되네요. > >뭐가 문제인지도 모르겠어요.. 어떤 조건으로 분석하신지 모르겠지만, - 일반적으로 다음과 같은 기본적인 mobile phase를 권장합니다. Phosphate buffer (pH 8): ACN: MeOH = 60:20:20 (기기와 랩에 따라서 비율이 조금씩 다를 수는 있습니다.) - standard Azi를 녹이실때, 위 buffer에 넣고 완전히 녹이기 위해서 2-5 mg/mL의 농도로 약 2-3분 sonication을 시켜주세요. - 보통 LC column은 ODS column을 권장합니다. - Wavelength는 214 ~ 216 nm 에서 셋팅하세요. 그 외 부가적인 정보는 첨부하는 논문을 참고해 보세요. 위 조건대로라면 약 5~ 10분 이내의 retention time을 가지고 분석이 될 것입니다. -
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조윤환님의 답변
2010-01-06- 2
사용하신 분석조건을 명시하셨으면... 좀 더 정확한 도움을 드릴 수 있을텐데요. 분석조건이라는 것이 워낙 많으니까요. 정확한 사정은 모르겠으나, 좀 낮은 농도로 분석하신게 아닌가 의심됩니다. 일반적으로 사용하는 UV detector를 사용하셨다면, 분석 농도를 좀 높여야 합니다. 화합물 자체가 UV 흡광계수가 낮기 때문에 유럽약전의 분석조건이나 여타의 UV detector를 사용하는 방법에선 분석 농도가 일반적인 경우보다 높거나 많은 양을 주입합니다. 흡광계수가 낮아서 피크 면적이 작기 때문이죠. 만약 이러한 경우가 아니라면 완충용액의 pH, 컬럼의 종류 등 뭔가 잘못된 부분이 있을 겁니다. 컬럼의 경우도 모든 것이 같아도 end-capped, 또는 base deactivated 등의 수식어가 붙은 컬럼과 그렇지 않은 컬럼과는 전혀 틀린 크로마토그램이 얻어집니다. 잘 확인해 보세요. 참고로 유럽약전 시험법을 첨부합니다. 불순물함량 시험에 초점이 맞춰진 방법이라 사용하시기 어렵겠지만요. -
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김범수님의 답변
2010-01-07- 2
>HPLC를 이용하여 azithromycin 분석해보신분? > >검량선을 만들려고 제가 논문에 나와있는데로 이동상을 만들어서 LC를 돌렸는데 > >도저히 분석이 안되네요. > >예상되는 시간에 peak가 나오질 않고 azithromycin이라 예상되는 peak를 농도별로 보면 > >area 값이 차이가 없고... > >다른 약물들은 잘만 되는데 azi만 잘 안되네요. > >뭐가 문제인지도 모르겠어요.. 첨부자료로 한번 해보세요. ^^ 직접 사이트에 가셔도 되구요. ^^ http://search.kfda.go.kr/search/index.jsp -
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안길홍님의 답변
2010-02-03- 0
>HPLC를 이용하여 azithromycin 분석해보신분? > >검량선을 만들려고 제가 논문에 나와있는데로 이동상을 만들어서 LC를 돌렸는데 > >도저히 분석이 안되네요. > >예상되는 시간에 peak가 나오질 않고 azithromycin이라 예상되는 peak를 농도별로 보면 > >area 값이 차이가 없고... > >다른 약물들은 잘만 되는데 azi만 잘 안되네요. > >뭐가 문제인지도 모르겠어요.. 첨부자료