2010-02-03
org.kosen.entty.User@7f1179d4
성윤재(bluesea0830)
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soft agar colony formation assay 의 원리는 무엇인가요?
NIH3T3로 실험을 할계획인데, soft agar 사용할 생각입니다. 그런데 왜
soft agar을 사용해야하는지... 원리 / 이론을 알고싶습니다,
제가 찾아본봐로는 soft agar은 부착되지 않고 증식하는 세포를 사용할때 사용한다고하는데.. 제가 궁굼한건 왜 굳이 soft agar을 사용해야하는지 궁굼합니다.
꼭 공중에 띄어서 사용해야하는지...
정확한 원리좀 알고싶습니다. 선배님들 꼭 부탁드립니다.
soft agar 프로토콜은 어떻게 되는지...
- soft agar
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답변 2
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답변
이상후님의 답변
2010-02-03- 3
>soft agar colony formation assay 의 원리는 무엇인가요? > >NIH3T3로 실험을 할계획인데, soft agar 사용할 생각입니다. 그런데 왜 >soft agar을 사용해야하는지... 원리 / 이론을 알고싶습니다, > >제가 찾아본봐로는 soft agar은 부착되지 않고 증식하는 세포를 사용할때 사용한다고하는데.. 제가 궁굼한건 왜 굳이 soft agar을 사용해야하는지 궁굼합니다. > >꼭 공중에 띄어서 사용해야하는지... > >정확한 원리좀 알고싶습니다. 선배님들 꼭 부탁드립니다. > > > >soft agar 프로토콜은 어떻게 되는지... > > Soft agar colony formation assay는 부착하지 않고 증식하는 세포를 관찰하는 데 가장 공통적으로 사용되는 방법이지만, 증식을 측정하는데 있어 3~4주 정도의 시간이 걸립니다. anchorage independency 여부를 확인하기 위한 시험에 사용되고, 생체내에서 tumorigenic인지 아닌지에 대한 확인 방법이라고 볼 수 있습니다. 두가지 다른 농도를 사용하는데, 아래는 높은 농도, 위에는 낮은농도의 agar를 쓰구요. 일단 hard agar를 깐 다음에 세포와 적절한 온도로 식은 soft agar를 섞어서 그 위에 로딩해주면 됩니다. colony 확인은 세포주에 따라 다르겠지만 보통 3-4주 걸립니다. 콜로니를 H&E로 염색하거나 해서 counting 해주거나 크기를 재면 됩니다. -
답변
안길홍님의 답변
2010-02-03- 0
(1)trasformation에서 phenotypic change (2)cell anchorage independence 이므로 soft agar를 사용함.