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단백질 운송및 사용

제가 이번에 단백질에관한 실험을 하게 되었는데요 다른곳으로부터 샘플을 받아와야합니다. 샘플은 동결건조 되어있구요 질문1. -80c에서 보관해야하는 걸로 알고있는데 액질로 보관해서 가져와야하나요? 아니면 드라이아이스로도 충분 할까요?? 질문2. 시료는 바로 버퍼에 녹여서 사용하면 되나요?? 실험은 western blot 혹은 ELISA등을 진행할 예정입니다.
  • 단백질
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    이동원님의 답변

    >제가 이번에 단백질에관한 실험을 하게 되었는데요 > >다른곳으로부터 샘플을 받아와야합니다. > >샘플은 동결건조 되어있구요 > >질문1. -80c에서 보관해야하는 걸로 알고있는데 액질로 보관해서 가져와야하나요? 아니면 드라이아이스로도 충분 할까요?? > >질문2. 시료는 바로 버퍼에 녹여서 사용하면 되나요?? > >실험은 western blot 혹은 ELISA등을 진행할 예정입니다. 1. 동결건조된 단백질이라면 아이스팩이 있는 정도로 운반하셔도 지장이 없습니다. 2. 역시 동결건조된 단백질이라면 이미 버퍼가 함께 있을 것입니다, 그쪽에서 사용한 버퍼시스템을 알아보시고, 동결건조된 볼륨에 맞는 멸균수에 녹이시면 됩니다. 물론 사용하려는 버퍼 시스템과 맞지않는 버퍼상태라면, 당연히 dialysis나 desalting을 하셔서 원하는 버퍼 시스템으로 바꾼후 사용하시면 됩니다. 3. 웨스턴 용이라면 2에서 언급한 버퍼 change를 하실 필요없이, 그냥 사용하시면 됩니다.
    >제가 이번에 단백질에관한 실험을 하게 되었는데요 > >다른곳으로부터 샘플을 받아와야합니다. > >샘플은 동결건조 되어있구요 > >질문1. -80c에서 보관해야하는 걸로 알고있는데 액질로 보관해서 가져와야하나요? 아니면 드라이아이스로도 충분 할까요?? > >질문2. 시료는 바로 버퍼에 녹여서 사용하면 되나요?? > >실험은 western blot 혹은 ELISA등을 진행할 예정입니다. 1. 동결건조된 단백질이라면 아이스팩이 있는 정도로 운반하셔도 지장이 없습니다. 2. 역시 동결건조된 단백질이라면 이미 버퍼가 함께 있을 것입니다, 그쪽에서 사용한 버퍼시스템을 알아보시고, 동결건조된 볼륨에 맞는 멸균수에 녹이시면 됩니다. 물론 사용하려는 버퍼 시스템과 맞지않는 버퍼상태라면, 당연히 dialysis나 desalting을 하셔서 원하는 버퍼 시스템으로 바꾼후 사용하시면 됩니다. 3. 웨스턴 용이라면 2에서 언급한 버퍼 change를 하실 필요없이, 그냥 사용하시면 됩니다.
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    이상후님의 답변

    >제가 이번에 단백질에관한 실험을 하게 되었는데요 > >다른곳으로부터 샘플을 받아와야합니다. > >샘플은 동결건조 되어있구요 > >질문1. -80c에서 보관해야하는 걸로 알고있는데 액질로 보관해서 가져와야하나요? 아니면 드라이아이스로도 충분 할까요?? > >질문2. 시료는 바로 버퍼에 녹여서 사용하면 되나요?? > >실험은 western blot 혹은 ELISA등을 진행할 예정입니다. 거리가 멀다면 아이스팩이나 드라이아이스 하에서 스티로품 박스에 sealing후 운송할 필요가 있습니다. 왜냐하면 동결건조됐더라도 상온이 되면 공기중 수분을 흡수할 가능성이 있기 때문이죠. 확실하게 운반하는 것이 예방차원에서 좋겠죠. 버퍼는 pH가 중요할거 같군요. pH만 맞으면 버퍼를 구성하는 ion들의 ionic strength는 단백질의 activity에 크게 영향을 미치지 않습니다. Western하실 거면 final buffer에 녹인 후 바로 적용해도 무방합니다.
    >제가 이번에 단백질에관한 실험을 하게 되었는데요 > >다른곳으로부터 샘플을 받아와야합니다. > >샘플은 동결건조 되어있구요 > >질문1. -80c에서 보관해야하는 걸로 알고있는데 액질로 보관해서 가져와야하나요? 아니면 드라이아이스로도 충분 할까요?? > >질문2. 시료는 바로 버퍼에 녹여서 사용하면 되나요?? > >실험은 western blot 혹은 ELISA등을 진행할 예정입니다. 거리가 멀다면 아이스팩이나 드라이아이스 하에서 스티로품 박스에 sealing후 운송할 필요가 있습니다. 왜냐하면 동결건조됐더라도 상온이 되면 공기중 수분을 흡수할 가능성이 있기 때문이죠. 확실하게 운반하는 것이 예방차원에서 좋겠죠. 버퍼는 pH가 중요할거 같군요. pH만 맞으면 버퍼를 구성하는 ion들의 ionic strength는 단백질의 activity에 크게 영향을 미치지 않습니다. Western하실 거면 final buffer에 녹인 후 바로 적용해도 무방합니다.
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