2010-06-30
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이미진(myjc7)
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단독으로 HPLC 사용 시 20*250mm 의 column을 사용해도 되나요?
제가 사용하고 있는 LC 가 agilent 1200 모델인데요
압력이 200 bar 정도를 넘어가면 pump 에 좋지 않다고하던데,
이 사용항하고자하는 column은 최대 압력이 6000psi로 되어있습니다
약 400bar 까지는 견딘다는 얘기인데,
HPLC 가 prap-LC가 아니고 일반 LC입니다.
이 기기에 사용해도 무방한지는 어떻게 결정해야하는지 모르겠습니다.
답변 부탁드릴게요.
- HPLC
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답변 4
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답변
조윤환님의 답변
2010-06-30- 0
일반적으로 분석용 HPLC pump가 지원 가능한 최고유속이 10 mL/min 입니다. prep-HPLC의 경우엔 2~100 mL/min 입니다. 범위가 겹치니 될 것도 같지만......4.6*250 mm의 일반적인 LC 컬럼의 경우 void volumn이 2 mL 정도인데 반해 20*250mm column의 경우 60 mL 정도로 차이가 큽니다. 자동차에 비유하자면 분석용 HPLC의 펌프는 승용차고, prep-HPLC용 펌프는 대형화물차 쯤 됩니다. 둘다 시속 60 km로 달릴 수는 있지만 승용차는 화물차처럼 몇 톤씩되는 짐을 싫고 달리진 못하죠. 제생각엔 어려울 것 같습니다. -
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최규석님의 답변
2010-06-30- 0
>단독으로 HPLC 사용 시 20*250mm 의 column을 사용해도 되나요? > >제가 사용하고 있는 LC 가 agilent 1200 모델인데요 >압력이 200 bar 정도를 넘어가면 pump 에 좋지 않다고하던데, > >이 사용항하고자하는 column은 최대 압력이 6000psi로 되어있습니다 >약 400bar 까지는 견딘다는 얘기인데, > >HPLC 가 prap-LC가 아니고 일반 LC입니다. > >이 기기에 사용해도 무방한지는 어떻게 결정해야하는지 모르겠습니다. > >답변 부탁드릴게요. > > 저도 에이질런트 1200 시리즈 사용하고 있습니다. LC를 오래 사용하 실거면 압력이 오버되지 않는 범위의 컬럼을 사용하시는것이 좋습니다. 그래야 장비에 무리가 가지 않겠지요. 컬럼을 바꿔 보시던지 아니면 시간이 오래 걸려도 된다 생각하시면 압력을 낮춰서 사용해보시는 것도 괜찮을것 같네요 -
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이종석님의 답변
2010-07-01- 0
우선 압력은 크게 문제되지 않을걸로 예상됩니다. 왜냐하면, 일반적으로 prep용 컬럼은 분석용 컬럼보다 pore size가 큰 경우가 많습니다. 보통 10um정도 될겁니다. 이경우 상대적으로 압력은 낮게 걸립니다. 더구나 HPLC의 최대 flow가 10ml/min이니 샘플전처리만 잘 하시면 최대압력을 넘어갈일이 거의 없을것입니다. 반면 문제는 flow인데요... 최대 10ml/min으로 장시간 사용시에 펌프에 문제가 생길수 있습니다. 마라톤 할때 100미터 달리듯이 달리면 완주를 못할것은 뻔한일 아니겠어요... Flow를 7-8ml/min으로 분석조건을 잡으시고 분석하시면 임시로 사용하시기에는 문제없을것입니다. 다만 분석시간이 조금더 걸리겠지만요~^^* 지속적으로 prep. 컬럼을 사용하실려면 당연히 prep LC를 사용하셔야 합니다... >단독으로 HPLC 사용 시 20*250mm 의 column을 사용해도 되나요? > >제가 사용하고 있는 LC 가 agilent 1200 모델인데요 >압력이 200 bar 정도를 넘어가면 pump 에 좋지 않다고하던데, > >이 사용항하고자하는 column은 최대 압력이 6000psi로 되어있습니다 >약 400bar 까지는 견딘다는 얘기인데, > >HPLC 가 prap-LC가 아니고 일반 LC입니다. > >이 기기에 사용해도 무방한지는 어떻게 결정해야하는지 모르겠습니다. > >답변 부탁드릴게요. > > -
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심용호님의 답변
2010-09-22- 0
급한 실험때문에 프랩컬럼을 일반 LC에 걸어봤었습니다. 일단, 컬럼의 최대압력은 컬럼이 망가지지 않는 조건입니다. 일반컬럼을 프랩엘시에 걸었을 경우 압력이 너무 세서, 컬럼의 비드들이 깨집니다. -_-.. 즉, 그 컬럼을 다시 일반컬럼에 사용하면 피크들이 빨리 나오는 등의 분리능 저하 문제가 발생됩니다. 기계의 최대압력은 안전장치가 있어서 자동으로 안전하게 셧다운 됩니다. 하지만 이런 현상이 자주 있으면 펌프가 상합니다. 참고로 전처리가 미숙해서 이물질이 많이 들어가서 압력이 높은 경우도 있으므로 연결부위, 펌프 등을 자주 세척해주셔야 합니다. 프리컬럼을 걸어서 필터링을 해주는 것도 하나의 방법입니다. 마지막으로 일반엘시로 프랩컬럼을 연결했을 경우... 압력 문제는 없습니다. 다만 기계압력, 플로우 고려해서 테스트를 하면 플로우가 충분치 못해서 물질이 제때 안 나옵니다. 거기다가 플로우가 낮다보니 물질이 조금씩 나옵니다. 즉 피크가 엄청나게 길고 테일링까지 생깁니다. 베이스라인에 붙어서 나오기도 하고요.. 이거회수해서 정제하는데 엄청 피곤합니다. 그리고 실험조건을 찾아야한다면.. 엄청 시간/용매 낭비합니다. -_- 결론은 프랩컬럼은 프랩엘시에 쓰시는것이 현명합니다. (분리코자하는 물질이 단일 물질이며 순도가 높은 경우에는 한번 테스트 해볼만 합니다. 그게 아니라면 시간낭비 입니다) >단독으로 HPLC 사용 시 20*250mm 의 column을 사용해도 되나요? > >제가 사용하고 있는 LC 가 agilent 1200 모델인데요 >압력이 200 bar 정도를 넘어가면 pump 에 좋지 않다고하던데, > >이 사용항하고자하는 column은 최대 압력이 6000psi로 되어있습니다 >약 400bar 까지는 견딘다는 얘기인데, > >HPLC 가 prap-LC가 아니고 일반 LC입니다. > >이 기기에 사용해도 무방한지는 어떻게 결정해야하는지 모르겠습니다. > >답변 부탁드릴게요. > >