지식나눔

Amicon membrane 다시한번 자세하게 써서 질문합니다 !!^^;;

amicon millipore YM membrane Dia 25mm NMWL 3,000 www.millipore.com cat No. PLB02510 ultrafiltration membrane regernerated cellulose 이 membrane은 쓰고나서 20%EtOH에 저장을 해놔야 하는데, TBS/T에 실수로 저장을 하루정도 했습니다. TBS/T의 조성은, Tris 25mM Nacl 0.09% Tweenx20 0.05% 입니다. 원래 membrane을 쓰고나서 워싱할때 1M Nacl로 30분워싱 후에 물로도 조금 워싱해줍니다. 워싱시에는 비커에 물이나 Nacl을 담아서 shaker로 워싱합니다. 그래서 물위에 membrane이 뜨는데, TBS/T에 넣고 나서는 membrane이 뜨지않고 자꾸 가라앉습니다. 이상이 생기긴 한것 같은데요..
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답변 1
  • 답변

    장성재님의 답변

    앞서 말씀드린 것 처럼 하루정도 TBS-T에 냉장 보관하였다고 cellulose로 형성된 막이 상하지는 않습니다. 제 생각에는 molecular cutoff가 3,000 인것으로 보아 미세한 pore를 가지므로, pore 내부가 TBS-T에 saturation되어 물에 뜨는 현상이 없어진 것으로 보입니다만.... 1M NaCl로 washing하는 것은 비특이적인 단백질의 막힘 (흡착) 등을 제거하기 위한 것입니다. 십여년전 쯤에는 UF membrane이 비싸다고 하여 학교에서 실험할 때 깨끗히 씻은 후 재활용해서 사용하곤 했습니다만....최근에도 변함이 없군요....ㅜㅜ 우선 압력을 걸어주었을 때 제대로 걸린다면 문제없이 사용하실 수 있을 것 같습니다. >amicon millipore YM membrane >Dia 25mm >NMWL 3,000 >www.millipore.com >cat No. PLB02510 >ultrafiltration membrane >regernerated cellulose > >이 membrane은 쓰고나서 20%EtOH에 저장을 해놔야 하는데, >TBS/T에 실수로 저장을 하루정도 했습니다. > >TBS/T의 조성은, >Tris 25mM >Nacl 0.09% >Tweenx20 0.05% 입니다. > >원래 membrane을 쓰고나서 워싱할때 1M Nacl로 30분워싱 후에 물로도 조금 워싱해줍니다. 워싱시에는 비커에 물이나 Nacl을 담아서 shaker로 워싱합니다. >그래서 물위에 membrane이 뜨는데, >TBS/T에 넣고 나서는 membrane이 뜨지않고 자꾸 가라앉습니다. >이상이 생기긴 한것 같은데요..
    앞서 말씀드린 것 처럼 하루정도 TBS-T에 냉장 보관하였다고 cellulose로 형성된 막이 상하지는 않습니다. 제 생각에는 molecular cutoff가 3,000 인것으로 보아 미세한 pore를 가지므로, pore 내부가 TBS-T에 saturation되어 물에 뜨는 현상이 없어진 것으로 보입니다만.... 1M NaCl로 washing하는 것은 비특이적인 단백질의 막힘 (흡착) 등을 제거하기 위한 것입니다. 십여년전 쯤에는 UF membrane이 비싸다고 하여 학교에서 실험할 때 깨끗히 씻은 후 재활용해서 사용하곤 했습니다만....최근에도 변함이 없군요....ㅜㅜ 우선 압력을 걸어주었을 때 제대로 걸린다면 문제없이 사용하실 수 있을 것 같습니다. >amicon millipore YM membrane >Dia 25mm >NMWL 3,000 >www.millipore.com >cat No. PLB02510 >ultrafiltration membrane >regernerated cellulose > >이 membrane은 쓰고나서 20%EtOH에 저장을 해놔야 하는데, >TBS/T에 실수로 저장을 하루정도 했습니다. > >TBS/T의 조성은, >Tris 25mM >Nacl 0.09% >Tweenx20 0.05% 입니다. > >원래 membrane을 쓰고나서 워싱할때 1M Nacl로 30분워싱 후에 물로도 조금 워싱해줍니다. 워싱시에는 비커에 물이나 Nacl을 담아서 shaker로 워싱합니다. >그래서 물위에 membrane이 뜨는데, >TBS/T에 넣고 나서는 membrane이 뜨지않고 자꾸 가라앉습니다. >이상이 생기긴 한것 같은데요..
    성다래(ekfo87) 2010-09-16

    1M NaCl로 washing 했는데도 . 물에 가라앉네요..ㅜ 새것으로사용하겟습니다. ㅎㅎ 답변 열심히해주셔서 감사합니다 ^^많은도움되엇어요! ㅎ