지식나눔

gst fusion protein 결과 분석 설명좀 부탁 드립니다.

안녕하세요. 논문을 보다가 지식이 짧아 결과 해석 도움을 요청하려고 합니다. Phosphorylation of Sox2 Cooperates in Reprogramming to Pluripotent Stem Cells 라는 논문을 읽고 있었는데요. gst-fusion protein 이라는 실험이 나오더라고요. 사실 처음 보는 것은 아니겠지만 생소했습니다. 그래서 관련 자료를 모으고 있었는데 단백질 정제 기술중 하나라고 하더군요. 하지만 그것의 원리를 잘 모르겠습니다. ㅡㅜ.. 어디 설명이 나와 있는 곳이 있는지 아니면 설명좀 부탁드리겠습니다. 그리고 한가지 더 부탁드리자면 여기 실험에서는 이러한 기술로 gene의 특정 site에 인산화가 됨을 알게되었는데요.. 이역시도 어떻게 되는건지 부탁 드리겠습니다. 수고하세요~
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답변 1
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    최기섭님의 답변

    >안녕하세요. 논문을 보다가 지식이 짧아 결과 해석 도움을 요청하려고 합니다. > >Phosphorylation of Sox2 Cooperates in Reprogramming to Pluripotent >Stem Cells > >라는 논문을 읽고 있었는데요. gst-fusion protein 이라는 실험이 나오더라고요. 사실 처음 보는 것은 아니겠지만 생소했습니다. 그래서 관련 자료를 모으고 있었는데 단백질 정제 기술중 하나라고 하더군요. 하지만 그것의 원리를 잘 모르겠습니다. ㅡㅜ.. > >어디 설명이 나와 있는 곳이 있는지 아니면 설명좀 부탁드리겠습니다. > >그리고 한가지 더 부탁드리자면 여기 실험에서는 이러한 기술로 gene의 특정 site에 인산화가 됨을 알게되었는데요.. 이역시도 어떻게 되는건지 부탁 드리겠습니다. > >수고하세요~ GST fusion protein에 대해서만 말씀드리면, 재조합 단백질을 생산하기 위해서 vector에 cloning할때 GST gene sequence가 들어있는 vector에 발현시키기 위한 gene을 넣는 것입니다. 그렇게 되면 GST+target protein의 형태로 발현되고, GST가 specific하게 binding하는 정제용 resin을 사용해서 분리하면 한번의 column work으로 단백질을 얻을 수 있습니다. His tag, MBP등을 tagging하는 plasmid vector들도 상용화되어 있습니다. 특별한 protease를 사용하면 GST를 target protein에서 잘라낼 수도 있습니다. 좋은 결과있으시길 바랍니다.
    >안녕하세요. 논문을 보다가 지식이 짧아 결과 해석 도움을 요청하려고 합니다. > >Phosphorylation of Sox2 Cooperates in Reprogramming to Pluripotent >Stem Cells > >라는 논문을 읽고 있었는데요. gst-fusion protein 이라는 실험이 나오더라고요. 사실 처음 보는 것은 아니겠지만 생소했습니다. 그래서 관련 자료를 모으고 있었는데 단백질 정제 기술중 하나라고 하더군요. 하지만 그것의 원리를 잘 모르겠습니다. ㅡㅜ.. > >어디 설명이 나와 있는 곳이 있는지 아니면 설명좀 부탁드리겠습니다. > >그리고 한가지 더 부탁드리자면 여기 실험에서는 이러한 기술로 gene의 특정 site에 인산화가 됨을 알게되었는데요.. 이역시도 어떻게 되는건지 부탁 드리겠습니다. > >수고하세요~ GST fusion protein에 대해서만 말씀드리면, 재조합 단백질을 생산하기 위해서 vector에 cloning할때 GST gene sequence가 들어있는 vector에 발현시키기 위한 gene을 넣는 것입니다. 그렇게 되면 GST+target protein의 형태로 발현되고, GST가 specific하게 binding하는 정제용 resin을 사용해서 분리하면 한번의 column work으로 단백질을 얻을 수 있습니다. His tag, MBP등을 tagging하는 plasmid vector들도 상용화되어 있습니다. 특별한 protease를 사용하면 GST를 target protein에서 잘라낼 수도 있습니다. 좋은 결과있으시길 바랍니다.

    커다란 도움이 되었습니다. 감사드립니다.