2010-11-04
org.kosen.entty.User@164a4246
김대환(koko1813)
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안녕하세요. 논문을 보다가 지식이 짧아 결과 해석 도움을 요청하려고 합니다.
Phosphorylation of Sox2 Cooperates in Reprogramming to Pluripotent
Stem Cells
라는 논문을 읽고 있었는데요. gst-fusion protein 이라는 실험이 나오더라고요. 사실 처음 보는 것은 아니겠지만 생소했습니다. 그래서 관련 자료를 모으고 있었는데 단백질 정제 기술중 하나라고 하더군요. 하지만 그것의 원리를 잘 모르겠습니다. ㅡㅜ..
어디 설명이 나와 있는 곳이 있는지 아니면 설명좀 부탁드리겠습니다.
그리고 한가지 더 부탁드리자면 여기 실험에서는 이러한 기술로 gene의 특정 site에 인산화가 됨을 알게되었는데요.. 이역시도 어떻게 되는건지 부탁 드리겠습니다.
수고하세요~
- gst
- fusion
- protein
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 1
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답변
최기섭님의 답변
2010-11-05- 2
>안녕하세요. 논문을 보다가 지식이 짧아 결과 해석 도움을 요청하려고 합니다. > >Phosphorylation of Sox2 Cooperates in Reprogramming to Pluripotent >Stem Cells > >라는 논문을 읽고 있었는데요. gst-fusion protein 이라는 실험이 나오더라고요. 사실 처음 보는 것은 아니겠지만 생소했습니다. 그래서 관련 자료를 모으고 있었는데 단백질 정제 기술중 하나라고 하더군요. 하지만 그것의 원리를 잘 모르겠습니다. ㅡㅜ.. > >어디 설명이 나와 있는 곳이 있는지 아니면 설명좀 부탁드리겠습니다. > >그리고 한가지 더 부탁드리자면 여기 실험에서는 이러한 기술로 gene의 특정 site에 인산화가 됨을 알게되었는데요.. 이역시도 어떻게 되는건지 부탁 드리겠습니다. > >수고하세요~ GST fusion protein에 대해서만 말씀드리면, 재조합 단백질을 생산하기 위해서 vector에 cloning할때 GST gene sequence가 들어있는 vector에 발현시키기 위한 gene을 넣는 것입니다. 그렇게 되면 GST+target protein의 형태로 발현되고, GST가 specific하게 binding하는 정제용 resin을 사용해서 분리하면 한번의 column work으로 단백질을 얻을 수 있습니다. His tag, MBP등을 tagging하는 plasmid vector들도 상용화되어 있습니다. 특별한 protease를 사용하면 GST를 target protein에서 잘라낼 수도 있습니다. 좋은 결과있으시길 바랍니다.
커다란 도움이 되었습니다. 감사드립니다.