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zymography

안녕하세요? zymography 셋팅 과정 중에 있습니다. 2.5% Triton X-100이 washing 과정에서 들어가던데 solvent로 TNC buffer라는 것이 논문에서는 나오더군요? 브릭에서 검색하니 DW나 PBS 또는 TBS도 나오던데 zymography에서는 어떻게 하는 것이 좋을까요?
  • triton X- 100
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답변 3
  • 답변

    장성재님의 답변

    TNC buffer라는 것은 Tris-HCl, NaCl, CaCl2의 앞글자를 따서 만든 이름으로 특별한 buffer는 아닙니다. washing buffer에는 PBS, TBS 혹은 그냥 DW를 쓰셔도 큰 차이가 없습니다. 중요한 것은 detergent 성분인 Triton X-100인데, 0.05~2.5%까지 다양한 농도로 사용한 것이 논문에서 종종 보이며, 주로 2.5%일 경우에는 DW를 사용하고, TBS나 PBS에는 0.05%를 사용하는 것으로 보입니다. 저농도에서 시작해서 한번 테스트해보시길 바랍니다. >안녕하세요? >zymography 셋팅 과정 중에 있습니다. >2.5% Triton X-100이 washing 과정에서 들어가던데 >solvent로 TNC buffer라는 것이 논문에서는 나오더군요? >브릭에서 검색하니 DW나 PBS 또는 TBS도 나오던데 >zymography에서는 어떻게 하는 것이 좋을까요? >
    TNC buffer라는 것은 Tris-HCl, NaCl, CaCl2의 앞글자를 따서 만든 이름으로 특별한 buffer는 아닙니다. washing buffer에는 PBS, TBS 혹은 그냥 DW를 쓰셔도 큰 차이가 없습니다. 중요한 것은 detergent 성분인 Triton X-100인데, 0.05~2.5%까지 다양한 농도로 사용한 것이 논문에서 종종 보이며, 주로 2.5%일 경우에는 DW를 사용하고, TBS나 PBS에는 0.05%를 사용하는 것으로 보입니다. 저농도에서 시작해서 한번 테스트해보시길 바랍니다. >안녕하세요? >zymography 셋팅 과정 중에 있습니다. >2.5% Triton X-100이 washing 과정에서 들어가던데 >solvent로 TNC buffer라는 것이 논문에서는 나오더군요? >브릭에서 검색하니 DW나 PBS 또는 TBS도 나오던데 >zymography에서는 어떻게 하는 것이 좋을까요? >

    정말로 감사드립니다.

    답변 주신 sjsjj님, zymography 실험을 해 보신 적이 있으신지요? 주변에서 알아 보려고 해도
    하시는 분이 잘 없어서요. 궁금한 것이 많은데 괜찮으시다면 제가 메일로 질문 좀 드려도 될까요?
    저의 이메일은 zeatine@naver.com입니다.

    김상태(hsvkst) 2011-04-21

    SDS, TRIXTON-X100D을 사용하는데 이는 collagenases의 분해에 의해 original triple-helical conformation of collagen이 제거하는데 목적을 둠

  • 답변

    김종석님의 답변

    gelatin 이나 casein zymography를 주로 했으니 필요하시면 연락주세요 livingstream@cnu.ac.kr
    gelatin 이나 casein zymography를 주로 했으니 필요하시면 연락주세요 livingstream@cnu.ac.kr

    감사합니다. 연락 드리겠습니다.

  • 답변

    김상태님의 답변

    >안녕하세요? >zymography 셋팅 과정 중에 있습니다. >2.5% Triton X-100이 washing 과정에서 들어가던데 >solvent로 TNC buffer라는 것이 논문에서는 나오더군요? >브릭에서 검색하니 DW나 PBS 또는 TBS도 나오던데 >zymography에서는 어떻게 하는 것이 좋을까요? > GELATINASE의 작용으로 분해되도록 콜라젠의 original triple-helical conformation 제거 목적임
    >안녕하세요? >zymography 셋팅 과정 중에 있습니다. >2.5% Triton X-100이 washing 과정에서 들어가던데 >solvent로 TNC buffer라는 것이 논문에서는 나오더군요? >브릭에서 검색하니 DW나 PBS 또는 TBS도 나오던데 >zymography에서는 어떻게 하는 것이 좋을까요? > GELATINASE의 작용으로 분해되도록 콜라젠의 original triple-helical conformation 제거 목적임
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