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지식나눔

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FACS

2011-05-24 org.kosen.entty.User@17b57c9e 장현희(petfrog)
  • 2
human whole blood에서 RBC lysis 후, CD34,CD45,VEGFR2로 stain후, BD callibur 기계로 FACS를 수행하여 EPC number를 보려고 합니다. 논문상에서는 10ml의 blood에서 magnetic으로 MNC 분리 후, culture해서 FACS를 수행하던데요... 저희 교수님은 일본에 있을 때 2ml로도 측정이 가능하셨다고 하는데... 제가 실험해 본 결과 2ml로는 안나오던데요... 워낙 혈액내 epc 수가 적잖아요... 2ml안에서 그것도 FACS로 읽을 땐 만개 정도 읽거든요... culture 없이 gradient 안 걸고, 바로 RBC lysis 시켜서 FACS 하신 분이 있으시다면 protocol 부탁드려요
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  • 답변

    장성재님의 답변

    2011-05-31
    • 0

    첨부파일

    첨부한 자료를 참고하세요. >human whole blood에서 RBC lysis 후, CD34,CD45,VEGFR2로 stain후, BD callibur 기계로 FACS를 수행하여 EPC number를 보려고 합니다. >논문상에서는 10ml의 blood에서 magnetic으로 MNC 분리 후, culture해서 FACS를 수행하던데요... > >저희 교수님은 일본에 있을 때 2ml로도 측정이 가능하셨다고 하는데... >제가 실험해 본 결과 2ml로는 안나오던데요... >워낙 혈액내 epc 수가 적잖아요... >2ml안에서 그것도 FACS로 읽을 땐 만개 정도 읽거든요... > >culture 없이 gradient 안 걸고, 바로 RBC lysis 시켜서 FACS 하신 분이 있으시다면 protocol 부탁드려요
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    첨부한 자료를 참고하세요. >human whole blood에서 RBC lysis 후, CD34,CD45,VEGFR2로 stain후, BD callibur 기계로 FACS를 수행하여 EPC number를 보려고 합니다. >논문상에서는 10ml의 blood에서 magnetic으로 MNC 분리 후, culture해서 FACS를 수행하던데요... > >저희 교수님은 일본에 있을 때 2ml로도 측정이 가능하셨다고 하는데... >제가 실험해 본 결과 2ml로는 안나오던데요... >워낙 혈액내 epc 수가 적잖아요... >2ml안에서 그것도 FACS로 읽을 땐 만개 정도 읽거든요... > >culture 없이 gradient 안 걸고, 바로 RBC lysis 시켜서 FACS 하신 분이 있으시다면 protocol 부탁드려요
    등록된 댓글이 없습니다.
  • 답변

    김상태님의 답변

    2011-06-14
    • 0
    >human whole blood에서 RBC lysis 후, CD34,CD45,VEGFR2로 stain후, BD callibur 기계로 FACS를 수행하여 EPC number를 보려고 합니다. >논문상에서는 10ml의 blood에서 magnetic으로 MNC 분리 후, culture해서 FACS를 수행하던데요... > >저희 교수님은 일본에 있을 때 2ml로도 측정이 가능하셨다고 하는데... >제가 실험해 본 결과 2ml로는 안나오던데요... >워낙 혈액내 epc 수가 적잖아요... >2ml안에서 그것도 FACS로 읽을 땐 만개 정도 읽거든요... >우선 부피양이 많아야 하기도 하지만 세포농도도 무시못하죠 bead로 농축하여 최대한 많은 수를 확보하는 것이 중요하기에 방법상 bead를 통해 magnetic으로 순수분리하는 법을 더 노력하다 보면 노하우가 생김 >culture 없이 gradient 안 걸고, 바로 RBC lysis 시켜서 FACS 하신 분이 있으시다면 protocol 부탁드려요
    답변수정
    >human whole blood에서 RBC lysis 후, CD34,CD45,VEGFR2로 stain후, BD callibur 기계로 FACS를 수행하여 EPC number를 보려고 합니다. >논문상에서는 10ml의 blood에서 magnetic으로 MNC 분리 후, culture해서 FACS를 수행하던데요... > >저희 교수님은 일본에 있을 때 2ml로도 측정이 가능하셨다고 하는데... >제가 실험해 본 결과 2ml로는 안나오던데요... >워낙 혈액내 epc 수가 적잖아요... >2ml안에서 그것도 FACS로 읽을 땐 만개 정도 읽거든요... >우선 부피양이 많아야 하기도 하지만 세포농도도 무시못하죠 bead로 농축하여 최대한 많은 수를 확보하는 것이 중요하기에 방법상 bead를 통해 magnetic으로 순수분리하는 법을 더 노력하다 보면 노하우가 생김 >culture 없이 gradient 안 걸고, 바로 RBC lysis 시켜서 FACS 하신 분이 있으시다면 protocol 부탁드려요
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