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언급하신 배지는 modified 된 것으로 직접 제조하셔서 사용하셔야만 합니다. 배지 조성에서 항생제 (vancomycin, aztreonam, ceftazidime)를 제외한 성분들은 모두 함께 flask에 녹이신 후 pH를 보정하시고 감압 멸균하시면 됩니다. 이 후에 배지가 굳기 전에 약 50도 전 후 (agar 성분이 굳기 전으로 손으로 잡았을 경우 뜨거울 정도, 경험치 입니다.)에 항생제들을 첨가 하시고 dish (샤알레)에 25-30 mL씩 부어주시면 됩니다. 그리고 배지를 굳히시면 됩니다. > 제가 surveillane culture개념의 실험을 준비중인데, Acinetobacter baumannii만 잘 배양될 수 있는 조건의 배지를 만들어야 되어서요. > > 실험 초심자여서 항생제 배지 만드는 것이 만만치가 않을 것 같은데, 혹시 이런 항생제가 들어간 감별배지를 만드는 곳이 있나요? > > 정말 안되면 직접 아래와 같은 조성으로 Modified Leeds Acinetobacter media란 걸 만들어야되는데요. > 혹시 친절하게 설명해 주실 분...있으면 설명좀 부탁드려요. > 참고로 제가 실험은 전혀 해 보질 않은데다가 아직 실험기자재가 하나도 없어서요. > 뭘 준비해야 할지도 좀 알려주세요. > 부디 불쌍히 여기셔서...ㅜㅜ... 도와주세요... > >========================================================================= >Preparation of LAM(Leeds Acinetobacter media) > >LAM was prepared by adding the >following ingredients to distilled water: Bacteriological Agar >No. 1 (Oxoid L 11; Unipath Ltd.), 10 g/liter; acid casein >hydrolysate (Oxoid L 41), 15 g/liter; neutralized soy peptone >(Oxoid L 44), 5 g/liter; sodium chloride (Fisons Scientific >Equipment, Loughborough, England), 5 g/liter; D-(-)-fructose >(BDH Chemicals Ltd., Poole, England), 5 g/liter; sucrose >(BDH), 5 g/liter; D-mannitol (Sigma Chemical Co. Ltd., Poole, >England), 5 g/liter; L-phenylalanine (Sigma), 1 g/liter; ferric >ammonium citrate (BDH), 0.4 g/liter; and phenol red (BDH), >0.02 g/liter. The pH of the medium was adjusted to 7.0, and the >medium was steamed to dissolve the ingredients and then >autoclaved for 15 min at 1210C and 15 lb/in2. After cooling to >50 to 55°C, the following antibiotics were added: vancomycin at >10 mg/liter, cefsulodin at 15 mg/liter, and cephradine at 50 >mg/liter. Freshly poured plates were orange in color. They >were packed in plastic bags and stored at 4 ± 20C in the dark. > > >Modified Leeds Acinetobacter media > >The original LAM contains >vancomycin, cefsulodin, and cephradine. For the modified LAM (mLAM) used >in the present study, cefsulodin and cephradine were replaced with either 4ug/ml aztreonam or 8 ug/ml ceftazidime.

 우선 아래 성분들 중에서 가압멸균을 피해야하는 성분들은 빼주셔야 합니다. fructose 와

sucrose, mannitol은 syringe filter를 이용해서 여과시켜서 넣어주시는 것이 좋습니다.(그냥 이

 성분들을 넣고 그냥 가압멸균하시는 분들도 있는데... 저의 견해에서는 비추입니다.) 다시

 말해서 아래의 배지 성분들 중에서 탄소원인 fructose, sucrose, mannitol, 항생제를 제외하고

제조하여 121'C에서 15분동안 멸균하고 55'C로 온도를 낮춘 후에(항온수조를 사용하는게 편합니

다... 그리고 배지를 만들때 미리 magentic bar를 넣어주는 방법도 좋습니다.) 각각의 탄소원을

pore size 0.2um의 syringe filter를 이용해서 주입(또는 Stock solution을 제조하고 syringe filter

로 멸균하여 무균용기에 보관한 것을 무균적으로 주입)하고 순차적으로 교반하고 55'C가 유지되

도록 합니다.(agar 성분이 굳지 않게 유지하기 위해서) 그리고 마지막으로 항생제를 주입하고 

교반한 다음에 petri dish에 주입하시면 됩니다. 기포가 생기지 않도록 주의하시면 될 듯 합니다.