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HPLC 분석시에 Threshold의 의미가 궁금합니다.

HPLC 분석시에 Threshold의 의미가 궁금합니다.

  • HPLC
  • Threshold
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답변 2
  • 답변

    조윤환님의 답변

     HPLC 분석에서 분석결과를 검출기의 신호 형태로 얻게 됩니다. 이 신호는 sw로 처리해서 결과치인 면피크적이나 피크 높이 등을 얻게 되는데... 이때 sw는 피크의 시작점과 끝점을 Threshold 값을 기준으로 인식하게 됩니다. 다시 말해서 Threshold의 값을 크게 설정하면 할 수록 피크로 인식되늠 부분이 줄어들게 됩니다. 피크 밑둥을 잘라 버린 것과 같은 효과인거죠. 

     

    이해가 되시는지 모르겠네요.

    -------------------------------------질문-------------------------------------

    HPLC 분석시에 Threshold의 의미가 궁금합니다.

     HPLC 분석에서 분석결과를 검출기의 신호 형태로 얻게 됩니다. 이 신호는 sw로 처리해서 결과치인 면피크적이나 피크 높이 등을 얻게 되는데... 이때 sw는 피크의 시작점과 끝점을 Threshold 값을 기준으로 인식하게 됩니다. 다시 말해서 Threshold의 값을 크게 설정하면 할 수록 피크로 인식되늠 부분이 줄어들게 됩니다. 피크 밑둥을 잘라 버린 것과 같은 효과인거죠. 

     

    이해가 되시는지 모르겠네요.

    -------------------------------------질문-------------------------------------

    HPLC 분석시에 Threshold의 의미가 궁금합니다.

    Blk 를 분석한뒤에 그 data의 Threshold 를 확인하고
    sample 분석시에 Blk Threshold 의 2배로 Threshold 를 적용하여 분석하라는건
    무슨 의미일까요??
    제가 이 말뜻을 잘 모르겠습니다.

    Blk 를 분석한뒤에 그 data의 Threshold 를 확인하라는 부분의 threshold는 noise level을 확인하라는 뜻으로 봐야겠군요. 보통 검출한계 설정시 s/n ratio의 3배(또는 3.3배) 정도를 잡는 것과 같은 맥락이죠.

  • 답변

    이상후님의 답변

     

    -------------------------------------질문-------------------------------------

    HPLC 분석시에 Threshold의 의미가 궁금합니다.

     

    Blank를 분석하게 되면 blank 고유의 baseline이 만들어 지는데, 이것의 threshold는 S/N ratio를 확인하여 그 값을 blank의 threshold로 정하고 실제 샘플 분석시에는 이것의 2배로 설정하게 되면 blank와 비슷한 range를 갖는 peak은 샘플 peak로 인식하지 못하게 할 수 있으며, 2배 이상이 되는 peak만 peak 로 인식하여 크로마토그램에 보여지게 되는 원리입니다. 

     

    -------------------------------------질문-------------------------------------

    HPLC 분석시에 Threshold의 의미가 궁금합니다.

     

    Blank를 분석하게 되면 blank 고유의 baseline이 만들어 지는데, 이것의 threshold는 S/N ratio를 확인하여 그 값을 blank의 threshold로 정하고 실제 샘플 분석시에는 이것의 2배로 설정하게 되면 blank와 비슷한 range를 갖는 peak은 샘플 peak로 인식하지 못하게 할 수 있으며, 2배 이상이 되는 peak만 peak 로 인식하여 크로마토그램에 보여지게 되는 원리입니다. 

    그럼 Blank를 찍고 샘플 분석시에 Threshold를 Blank의 Threshold와 같은 값을 넣어서 찍는 것과, Blank Threshold 값을 두배로 해서 찍는 것과는 purity가 많이 달라질텐데요
    제가 이해가 안되는 것이 부분은, 같은 샘플을 Threshold 2배로 놓고 찍었을 때가 Blank의 Threshold와 같은 값을 넣었을때 보다 Purity 가 더 좋아지는것 아닌가요??

    Purity라는 의미 보다는 원치 않는 peak(y축의 peak area가 낮은 것들)를 제거하고 난 나머지의 일정 높이 이상의 peak만이 크로마토그래피상에 나타나기 때문에 크로마토그래피가 깨끗하게 보여지는 것으로 바꿔 생각해 볼 수 있습니다. threshold를 높인다는 말은 다양한 높이의 산 봉우리들 중에 가장 낮은 것부터 시작해서 가장 높은 봉우리보다 한두 단계 낮은 봉우리까지 선을 그어서 그 선안에 들어오는 모든 봉우리들은 다 제거한다는 의미로 보시고, 반대로 threshold를 낮춘다는 말은 높이가 낮은 몇개의 봉우리들만 제거시킨 나머지 봉우리들을 크로마토그램상에 보여준다고 보시면 됩니다.