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안녕하세요 모기업체에서 천연물 분리정제 업무를 하고 있습니다.
다름이 아니라 MPLC or prep HPLC 에 관련해서 문의 드립니다.
현재 용매는 HPLC에서 A용매: formic acid B용매: ACN을 사용하고 있고 컬럼은 C18입니다.
이것을 MPLC로 같은 조건에서 천연물에서 특정성분을 분리하고자 합니다.
첫번째 분리목적은 특정성분(안토시아닌류)의 안정성(세포독성, 광안정성)을 보는 것입니다.
만약에 MPLC를 이용하여 분리하고자 한다면 용매인 acid류와 ACN이 농축을 하여 용매를 날린다 해도 분리한 물질에 묻어 따라 다니지 않을까요..
formic acid와 acn은 독성이 있다고 하는데 세포독성 실험및 광안정성에서 상당히 악영향을 끼칠것 같은데요..
리펀런스를 많이 찾아봐도 HPLC조건은 formic acid와 acn이 주를 이루더라 구요..
MPLC 및 prep-HPLC를 이용하여 특정성분을 분리하는 업무를 주로 하시다 이런 난관을 겪으신분 혹시 있으시면 도움 부탁드립니다.^^
- MPLC
- Prep-HPLC
- 안정성
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변
이용욱님의 답변
2011-11-03- 2
같은 업종에 종사하네요. 반갑습니다.
분리정제를 할 경우에는 identify만을 위한 소량이 아니고 독성이나 효능시험을 할 정도의 양을 분취할 때는 분석조건과 다른 조건을 찾아보시는 것을 권합니다.
일반적으로 역상조건은 용매로 물을 사용하기 때문에 용매의 제거가 쉽지 않구요. 질문하신 것처럼 ACN을 사용하는 경우라면 용매비용을 무척 많이 듭니다.
역상조건에서는 천연물성분의 retention time이 뒤에 나타나게 되는데, 순상조건에서는 빠른 시간에 나오게 됩니다. 당연히 시간도 절약됩니다.
순상조건을 찾아보시는게 좋을듯 합니다.
만약 역상조건으로 하셔야 한다면 결정을 얻는 조건을 찾으면 용매를 제거하는 수고를 덜 수 있고 고순도의 시료를 얻을 수 있습니다.
도움이 되었는지 모르겠네요.
-------------------------------------질문-------------------------------------
안녕하세요 모기업체에서 천연물 분리정제 업무를 하고 있습니다.
다름이 아니라 MPLC or prep HPLC 에 관련해서 문의 드립니다.
현재 용매는 HPLC에서 A용매: formic acid B용매: ACN을 사용하고 있고 컬럼은 C18입니다.
이것을 MPLC로 같은 조건에서 천연물에서 특정성분을 분리하고자 합니다.
첫번째 분리목적은 특정성분(안토시아닌류)의 안정성(세포독성, 광안정성)을 보는 것입니다.
만약에 MPLC를 이용하여 분리하고자 한다면 용매인 acid류와 ACN이 농축을 하여 용매를 날린다 해도 분리한 물질에 묻어 따라 다니지 않을까요..
formic acid와 acn은 독성이 있다고 하는데 세포독성 실험및 광안정성에서 상당히 악영향을 끼칠것 같은데요..
리펀런스를 많이 찾아봐도 HPLC조건은 formic acid와 acn이 주를 이루더라 구요..
MPLC 및 prep-HPLC를 이용하여 특정성분을 분리하는 업무를 주로 하시다 이런 난관을 겪으신분 혹시 있으시면 도움 부탁드립니다.^^
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답변
조윤환님의 답변
2011-11-03- 0
반갑습니다.
MPLC나 pre-HPLC를 사용한 분리는 보통 TLC나 분석용 HPLC 분석을 선행한 후 이를 바탕으로 분리조건을 결정해 실시하면서 분리조건을 조정하는 것이 보통이죠.
보통은 분리시 overloading으로 인해 분리도가 떨어질 수 있기 때문에 분취를 하고, 각 분취한 시료를 HPLC등으로 분석을 해서 적당한 분액을 골라냅니다.
분리 후 독성 관련 실험을 하실 목적이라 분리용 이동상의 독성이 걱정이신 듯 한데.....분리만 되면 이들을 제거하는 것은 걱정하지 않으셔도 됩니다. 진공건조를 하거나, basic solution으로 세척을 한다던가 하면 충분히 제거 가능하니까요.
사실 이 경우 분리에 비하면 이동상 용매를 제거하는 것은 어려운 일이 아니라고 판단됩니다.
행운을 빕니다.
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안녕하세요 모기업체에서 천연물 분리정제 업무를 하고 있습니다.
다름이 아니라 MPLC or prep HPLC 에 관련해서 문의 드립니다.
현재 용매는 HPLC에서 A용매: formic acid B용매: ACN을 사용하고 있고 컬럼은 C18입니다.
이것을 MPLC로 같은 조건에서 천연물에서 특정성분을 분리하고자 합니다.
첫번째 분리목적은 특정성분(안토시아닌류)의 안정성(세포독성, 광안정성)을 보는 것입니다.
만약에 MPLC를 이용하여 분리하고자 한다면 용매인 acid류와 ACN이 농축을 하여 용매를 날린다 해도 분리한 물질에 묻어 따라 다니지 않을까요..
formic acid와 acn은 독성이 있다고 하는데 세포독성 실험및 광안정성에서 상당히 악영향을 끼칠것 같은데요..
리펀런스를 많이 찾아봐도 HPLC조건은 formic acid와 acn이 주를 이루더라 구요..
MPLC 및 prep-HPLC를 이용하여 특정성분을 분리하는 업무를 주로 하시다 이런 난관을 겪으신분 혹시 있으시면 도움 부탁드립니다.^^