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HeLa cell culture 방법 및 배지 조성에대해 알고 싶습니다.
배지 조성은 어떻게 되고 배양 방법(CO2배양?) 등 관련 자료나 정보를 알 수 있을 까요?
- HeLa cell
- cell culture
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변
홍동호님의 답변
2011-12-06- 0
첨부파일
EMEM + 10% FCS 라고
에 나와 있는데 더 자세한 정보는 위의 사이트에 가시면 자세히 나와 있습니다.
그런데, 저는 세포배양을 할때 일반적으로 RPMI1640 medium에 10% FCS로 사용하였는데
문제 없이 잘 자랐습니다. 세포배양이 처음이신거 같은데 무엇보다도 세포배양은 세포의
morphology 유지가 가장 큰 관건 입니다.
도움이 되셨으면 합니다.
Propagation:
ATCC complete growth medium: The base medium for this cell line is ATCC-formulated Eagle's Minimum Essential Medium, Catalog No. 30-2003. To make the complete growth medium, add the following components to the base medium: fetal bovine serum to a final concentration of 10%.
Atmosphere: air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
Temperature: 37.0°C
Subculturing:
Protocol:
- Remove and discard culture medium.
- Briefly rinse the cell layer with 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA solution to remove all traces of serum which contains trypsin inhibitor.
- Add 2.0 to 3.0 ml of Trypsin-EDTA solution to flask and observe cells under an inverted microscope until cell layer is dispersed (usually within 5 to 15 minutes).
Note: To avoid clumping do not agitate the cells by hitting or shaking the flask while waiting for the cells to detach. Cells that are difficult to detach may be placed at 37°C to facilitate dispersal.
- Add 6.0 to 8.0 ml of complete growth medium and aspirate cells by gently pipetting.
- Add appropriate aliquots of the cell suspension to new culture vessels.
- Incubate cultures at 37°C.
Subcultivation Ratio: A subcultivation ratio of 1:2 to 1:6 is recommended
Medium Renewal: 2 to 3 times per week
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HeLa cell culture 방법 및 배지 조성에대해 알고 싶습니다.
배지 조성은 어떻게 되고 배양 방법(CO2배양?) 등 관련 자료나 정보를 알 수 있을 까요?
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답변
김상태님의 답변
2011-12-30- 0
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HeLa cell culture 방법 및 배지 조성에대해 알고 싶습니다.
배지 조성은 어떻게 되고 배양 방법(CO2배양?) 등 관련 자료나 정보를 알 수 있을 까요?
-배지는 DMEM medium이나 RPMI medium을 FBS10%정도에서 사용함