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지식나눔

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미생물 stock 보관 문의

2012-02-02 org.kosen.entty.User@3dac1988 채은정(bono2238)
  • 2

타 지역 연구원의 요청으로 바실러스 속 균 주를 균 배양액 과  20% DMSO를 1:1 (총 400ul)로

혼합하여 버스 택배로 전달하였습니다.

지역은 서울 -> 안동입니다.

 

안동 연구소의  디프리져의 온도는 -27'C였다고 하는데요,

보관한 후, 몇 주 후 사용하려고 꺼냈더니, 얼어있지 않다고 합니다.

 

그런데, 일반 냉장고의 냉동실로 옮겼더니 다시 얼었다고 하는군요,

 

저는 이런 경험이 처음인데, 다른 연구원 분은 이런 경험이 종종 있다고 하시더라구요.

원인을 물으니, 원인은 모르겠다고 하세요 ~~

 

이런 경우, 원인이 무엇이죠? 왜 안 얼었는지 궁금합니다.

 

그리고, 얼지 않은 미생물 stock을 사용해도 되나요??

 

알려주세요 !!!

  • 미생물
  • stock
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답변 2
  • 답변

    김중재님의 답변

    2012-02-10
    • 2

     

    -------------------------------------질문-------------------------------------

    타 지역 연구원의 요청으로 바실러스 속 균 주를 균 배양액 과  20% DMSO를 1:1 (총 400ul)로

    혼합하여 버스 택배로 전달하였습니다.

    지역은 서울 -> 안동입니다.

     

    안동 연구소의  디프리져의 온도는 -27'C였다고 하는데요,

    보관한 후, 몇 주 후 사용하려고 꺼냈더니, 얼어있지 않다고 합니다.

     

    그런데, 일반 냉장고의 냉동실로 옮겼더니 다시 얼었다고 하는군요,

     

    저는 이런 경험이 처음인데, 다른 연구원 분은 이런 경험이 종종 있다고 하시더라구요.

    원인을 물으니, 원인은 모르겠다고 하세요 ~~

     

    이런 경우, 원인이 무엇이죠? 왜 안 얼었는지 궁금합니다.

     

    그리고, 얼지 않은 미생물 stock을 사용해도 되나요??

     

    알려주세요 !!!

     

    우선 Bacillus 속의 균주는 spore 를 형성하기 때문에 대략 harsh 한 조건에서 보관되었더라도

    다시 배양해 내는데 큰 문제가 없습니다.

     

    20% DMSO 를 1:1 로 섞어서 사용하셨다면 최종 농도가 10% 가 될꺼고,

    아래 문헌을 보시면 10% DMSO-water solution 의 freezing point 는 0C 약간 아래입니다.

     

    http://www.arkema-inc.com/literature/pdf/118.pdf

     

    -27C 에선 얼었어야 한단 얘기죠.

     

    보통 deep freezer 에 내용물이 많이 들어 있으면 deep freezer 내의 온도가 균일하게 분포하지 않아

    문쪽의 온도는 사실 설정한 온도가 되지 않는 경우가 많습니다.

    만약 샘플을 받은 연구소의 deep freezer 에 내용물이 많았다면 입구쪽의 샘플을 얼지 않은채로 보관되었을 수 있었을 것 같습니다.

    그래서 저는 중요한 샘플은 냉장고 깊은 곳에 보관합니다.

     

    얼지 않았던 미생물의 stock 도 다시 streak 하여 활성화 시킨 뒤 사용하시면

    어떤 목적이든 무방하리라 생각됩니다.

    만약 plasmid 를 보유하고 있는 Bacillus 였다면 plasmid 의 존재 유무, 목적 유전자 보유 유무를

    확인하신 뒤 실험에 사용하시는 것이 안전(?)하실 것 같습니다.

     

    저의 경우 E. coli 나 Bacillus 등의 중온성 미생물을 보낼 때는 그냥 plate 에 streak 한뒤 plate 를 보냅니다.

    대부분 가는 동안 colony 가 생겨서 받는 사람도 사용하기 용이하니까요.

     

     

     

     

    답변수정

     

    -------------------------------------질문-------------------------------------

    타 지역 연구원의 요청으로 바실러스 속 균 주를 균 배양액 과  20% DMSO를 1:1 (총 400ul)로

    혼합하여 버스 택배로 전달하였습니다.

    지역은 서울 -> 안동입니다.

     

    안동 연구소의  디프리져의 온도는 -27'C였다고 하는데요,

    보관한 후, 몇 주 후 사용하려고 꺼냈더니, 얼어있지 않다고 합니다.

     

    그런데, 일반 냉장고의 냉동실로 옮겼더니 다시 얼었다고 하는군요,

     

    저는 이런 경험이 처음인데, 다른 연구원 분은 이런 경험이 종종 있다고 하시더라구요.

    원인을 물으니, 원인은 모르겠다고 하세요 ~~

     

    이런 경우, 원인이 무엇이죠? 왜 안 얼었는지 궁금합니다.

     

    그리고, 얼지 않은 미생물 stock을 사용해도 되나요??

     

    알려주세요 !!!

     

    우선 Bacillus 속의 균주는 spore 를 형성하기 때문에 대략 harsh 한 조건에서 보관되었더라도

    다시 배양해 내는데 큰 문제가 없습니다.

     

    20% DMSO 를 1:1 로 섞어서 사용하셨다면 최종 농도가 10% 가 될꺼고,

    아래 문헌을 보시면 10% DMSO-water solution 의 freezing point 는 0C 약간 아래입니다.

     

    http://www.arkema-inc.com/literature/pdf/118.pdf

     

    -27C 에선 얼었어야 한단 얘기죠.

     

    보통 deep freezer 에 내용물이 많이 들어 있으면 deep freezer 내의 온도가 균일하게 분포하지 않아

    문쪽의 온도는 사실 설정한 온도가 되지 않는 경우가 많습니다.

    만약 샘플을 받은 연구소의 deep freezer 에 내용물이 많았다면 입구쪽의 샘플을 얼지 않은채로 보관되었을 수 있었을 것 같습니다.

    그래서 저는 중요한 샘플은 냉장고 깊은 곳에 보관합니다.

     

    얼지 않았던 미생물의 stock 도 다시 streak 하여 활성화 시킨 뒤 사용하시면

    어떤 목적이든 무방하리라 생각됩니다.

    만약 plasmid 를 보유하고 있는 Bacillus 였다면 plasmid 의 존재 유무, 목적 유전자 보유 유무를

    확인하신 뒤 실험에 사용하시는 것이 안전(?)하실 것 같습니다.

     

    저의 경우 E. coli 나 Bacillus 등의 중온성 미생물을 보낼 때는 그냥 plate 에 streak 한뒤 plate 를 보냅니다.

    대부분 가는 동안 colony 가 생겨서 받는 사람도 사용하기 용이하니까요.

     

     

     

     

    채은정(bono2238) 2012-02-13

    좋은 정보 감사합니다 ^^

  • 답변

    이상후님의 답변

    2012-02-10
    • 2

    미생물 재사용 문제는 앞서 답변하신 분이 설명을 해 주었기 때문에,

    얼지 않은 이유에 대해서 답변드리겠습니다.

    DMSO의 원래 어는점은 상온 18.2'C입니다.

    그런데 이것은 100% DMSO의 물리적 성질이고, 물이나 다른 cosolvent가 포함되게 되면

    혼합물의 어는점은 더 낮아지게 됩니다. -27'C의 deep freezer에 넣었을 당시에는 20% DMSO의 어는점이 -27'C보다 더 낮았을 가능성이 높았을 것이고, 이것을 일반 냉장고의 냉동고의 넣게 되면 약간의 온도차이에 의해서 20% DMSO가 아닌 20% 이하로 미세한 변동이 생겼을 가능성이 있어 보입니다. 사실 이런 경우는 좀 특이해 보입니다.   

     

     

    -------------------------------------질문-------------------------------------

    타 지역 연구원의 요청으로 바실러스 속 균 주를 균 배양액 과  20% DMSO를 1:1 (총 400ul)로

    혼합하여 버스 택배로 전달하였습니다.

    지역은 서울 -> 안동입니다.

     

    안동 연구소의  디프리져의 온도는 -27'C였다고 하는데요,

    보관한 후, 몇 주 후 사용하려고 꺼냈더니, 얼어있지 않다고 합니다.

     

    그런데, 일반 냉장고의 냉동실로 옮겼더니 다시 얼었다고 하는군요,

     

    저는 이런 경험이 처음인데, 다른 연구원 분은 이런 경험이 종종 있다고 하시더라구요.

    원인을 물으니, 원인은 모르겠다고 하세요 ~~

     

    이런 경우, 원인이 무엇이죠? 왜 안 얼었는지 궁금합니다.

     

    그리고, 얼지 않은 미생물 stock을 사용해도 되나요??

     

    알려주세요 !!!

    답변수정

    미생물 재사용 문제는 앞서 답변하신 분이 설명을 해 주었기 때문에,

    얼지 않은 이유에 대해서 답변드리겠습니다.

    DMSO의 원래 어는점은 상온 18.2'C입니다.

    그런데 이것은 100% DMSO의 물리적 성질이고, 물이나 다른 cosolvent가 포함되게 되면

    혼합물의 어는점은 더 낮아지게 됩니다. -27'C의 deep freezer에 넣었을 당시에는 20% DMSO의 어는점이 -27'C보다 더 낮았을 가능성이 높았을 것이고, 이것을 일반 냉장고의 냉동고의 넣게 되면 약간의 온도차이에 의해서 20% DMSO가 아닌 20% 이하로 미세한 변동이 생겼을 가능성이 있어 보입니다. 사실 이런 경우는 좀 특이해 보입니다.   

     

     

    -------------------------------------질문-------------------------------------

    타 지역 연구원의 요청으로 바실러스 속 균 주를 균 배양액 과  20% DMSO를 1:1 (총 400ul)로

    혼합하여 버스 택배로 전달하였습니다.

    지역은 서울 -> 안동입니다.

     

    안동 연구소의  디프리져의 온도는 -27'C였다고 하는데요,

    보관한 후, 몇 주 후 사용하려고 꺼냈더니, 얼어있지 않다고 합니다.

     

    그런데, 일반 냉장고의 냉동실로 옮겼더니 다시 얼었다고 하는군요,

     

    저는 이런 경험이 처음인데, 다른 연구원 분은 이런 경험이 종종 있다고 하시더라구요.

    원인을 물으니, 원인은 모르겠다고 하세요 ~~

     

    이런 경우, 원인이 무엇이죠? 왜 안 얼었는지 궁금합니다.

     

    그리고, 얼지 않은 미생물 stock을 사용해도 되나요??

     

    알려주세요 !!!

    채은정(bono2238) 2012-02-13

    매번 좋은 답변 감사합니다 ^^

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