2015-09-07
org.kosen.entty.User@415dda79
정연익(youniks)
- 1
실험 상, fibroblast의M phase 단계 cell들을 얻어야 하는데,
문헌을 찾아보니 mitotic shake-off method를 이용하더라구요..
그런데 경험이 없다보니 protocol을 봐도 감이 잘 안잡힙니다.
어떤 형태의 shaker로 어떻게 해준다는 건지 ㅠㅠ
대부분 그냥 어느정도의 속도로 shaking한다 라고만 나와있고
동영상을 찾아봐도 없고 (제가 못찾은 것일수도 있습니다)
난감한 상황입니다..
혹 경험이 있으신 분들의 도움 부탁드립니다~~!!
문헌을 찾아보니 mitotic shake-off method를 이용하더라구요..
그런데 경험이 없다보니 protocol을 봐도 감이 잘 안잡힙니다.
어떤 형태의 shaker로 어떻게 해준다는 건지 ㅠㅠ
대부분 그냥 어느정도의 속도로 shaking한다 라고만 나와있고
동영상을 찾아봐도 없고 (제가 못찾은 것일수도 있습니다)
난감한 상황입니다..
혹 경험이 있으신 분들의 도움 부탁드립니다~~!!
- cell cycle
- M phase
- mitotic shake-off
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 1
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답변
김도연님의 답변
2015-09-07- 1
제가 이 실험을 많이 해본 전문가는 아니지만...
아무도 답을 달지 않고 계셔서 아주 조금이나마 도움이 되고자 일단 답을 드립니다.
mitotic phase에 가면 cell들이 round-up되면서 culture dish에 덜(less firmly) 붙어있게 됩니다. 하지만 아주 완전히 plate에서 떨어져서 떠다니는 상태는 아니라서 살짝의 물리적 충격으로 cell을 detach하여 모아서 분석을 하는 것 같습니다.
제 주위에서 보면, dish를 들고 dish 옆면을 톡톡 손으로 쳐서 떨어뜨리더군요. 이렇게 해도 보통 fibroblast는 dish 바닥에 붙어 자라기 때문에 다른 phase의 cell들은 거의 떨어지지 않습니다.
하지만 어떤 실험도 100%는 없다고 전 생각을 하는데요...M phase-rich portion을 모으는것이지 M phase의 cell"만" 모아진다고 생각하시면 안됩니다..cell이 많이 필요하시면 150cm dish 여러 개에서 실험을 하시거나 cell cycle arrest drug을 이용하시는 게 좋을 것 같아요.
더 자세한 답변은 이 실험을 많이 해보신 전문가께서 달아주시리라 기대하고 전 이만...
친절한 답변 감사드립니다. 많은 도움 되었습니다.