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pre hybridization 이 뭔지
hybridization 용액이뭔지 자세한 설명좀해주세요 ㅠ
- ssc
- hybridiation
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변
오현철님의 답변
2015-09-29- 1
위키에 나와있습니다.
https://en.wikipedia.org/wiki/Citrate#Buffering
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답변
김용준님의 답변
2015-10-01- 1
어떤 종류의 hybridization을 말씀하시는지는 모르겠으나,
일반적으로 pre hybridization은 probe의 non-specific binding을 최소화하기 위한 blocking작업이라고 생각하시면 됩니다.
Hybridization 용액이 SSC이기 때문에 질문을 주신것 같습니다. SSC는 여러가지 buffer들 중, salt의 생성을 최소화 할 수 있는 buffer이기 때문에 denatured DNA의 안정화를 위해서 사용합니다.
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답변
황규찬님의 답변
2015-10-07- 1
ssc의 용액의 용도와 pre hybridization 이 뭔지 hybridization 용액이뭔지 자세한 설명좀해주세요
답변
서던 (Southern blot; DNA) 혹은 노던 (Northern blot; RNA)이든지 probe가 원하는 상보적 서열에 결합하여 정성/정량 실험을 할때 지지체인 membrane에 제한된 전체 지놈이나 전체 RNA을 결합시킨 후, pre-hybridization buffer에는 probe가 비특이적으로 결합하는것을 막기 위한 과정이고 실제 probe 결합과정은 hybridization buffer 조건하에서 이루어집니다. 그리고 washing buffer로 비특이적 결합 probe를 제거하면 원하는 시스널(결과, band의 정량)을 얻습니다. 이들 과정들에서 SSC는 매우 중요합니다. SSC의 농도, 양, 시간, 횟수 등에 따라 결과가 좋을수 있기 때문에 조건을 잡을 때 이들 조건들을 잘 조합하여 실험하시기 바랍니다.
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황규찬님의 답변
2015-10-07- 1
ssc의 용액의 용도와 pre hybridization 이 뭔지 hybridization 용액이뭔지 자세한 설명좀해주세요
답변
서던 (Southern blot; DNA) 혹은 노던 (Northern blot; RNA)이든지 probe가 원하는 상보적 서열에 결합하여 정성/정량 실험을 할때 지지체인 membrane에 제한된 전체 지놈이나 전체 RNA을 결합시킨 후, pre-hybridization buffer에는 probe가 비특이적으로 결합하는것을 막기 위한 과정이고 실제 probe 결합과정은 hybridization buffer 조건하에서 이루어집니다. 그리고 washing buffer로 비특이적 결합 probe를 제거하면 원하는 시스널(결과, band의 정량)을 얻습니다. 이들 과정들에서 SSC는 매우 중요합니다. SSC의 농도, 양, 시간, 횟수 등에 따라 결과가 좋을수 있기 때문에 조건을 잡을 때 이들 조건들을 잘 조합하여 실험하시기 바랍니다.