지식나눔

HPLC 정량 후 함량분석

음 제가 HPLC로 정량을 해서 함량을 구하려고 하는데요.

우선 천연물 10Kg을 용매 200Kg으로 추출하여 527g의 추출물을 얻었습니다.(5.27%)

그 뒤 600, 300, 100ppm으로 Standard 검량선을 그린 후

EtOH 추출물을 730ppm으로 제조하여 10ul 주입하였습니다.

분석결과 449ppm의 분석량이 나왔는데요

여기서 에탄올 추출물에서 이 성분의 함량을 알고 싶습니다.
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답변 2
  • 답변

    심용호님의 답변

    첨부파일

    일단 검량선을 만드셨으니까, 성분을 주입할때 검량체들과 똑같은 양을 주입하신거죠?
    그럼 결과가 449ppm 나왔다면 그 성분이 449ppm이어야 앞뒤가 맞습니다.
    검량선을 바로 활용하시면 됩니다.
    그게 아니면 에탄올 추출물에 성분이 100프로가 아니었다는 이야기 같은데, 730을 넣어서 449 밖에 안나왔다면 61.5% 짜리라는 이야기가 되네요.
    일단 검량선을 만드셨으니까, 성분을 주입할때 검량체들과 똑같은 양을 주입하신거죠?
    그럼 결과가 449ppm 나왔다면 그 성분이 449ppm이어야 앞뒤가 맞습니다.
    검량선을 바로 활용하시면 됩니다.
    그게 아니면 에탄올 추출물에 성분이 100프로가 아니었다는 이야기 같은데, 730을 넣어서 449 밖에 안나왔다면 61.5% 짜리라는 이야기가 되네요.
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    이경인님의 답변

    추출물 시료와 표준품 시료의 주입량이 동일하게 10ul라면 윗분의 답변처럼 추출물 중 해당 성분의 함량은 61.5%가 맞습니다.
    그런데 일반적으로 천연물의 추출물 중 그렇게 높은 비율로 존재하는 성분이 많지 않으니 단순히 RT만 확인하는 방법만으로 정량을 완료할 것인지 검토하시면 좋을 것 같습니다.
    추출물 시료와 표준품 시료의 주입량이 동일하게 10ul라면 윗분의 답변처럼 추출물 중 해당 성분의 함량은 61.5%가 맞습니다.
    그런데 일반적으로 천연물의 추출물 중 그렇게 높은 비율로 존재하는 성분이 많지 않으니 단순히 RT만 확인하는 방법만으로 정량을 완료할 것인지 검토하시면 좋을 것 같습니다.
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