지식나눔

Column하는 방법에 대해 질문드립니다.

컬럼에서 로딩을 할때 product가 잘녹는 solvent를 최소한의 양으로 녹여서 균일하게 분포해서 스타팅라인에 맞춰줘야 되는데 균일하게 분포하는 방법으로 어떤게 있을까요?  눈사람컬럼이라 좀 힘드네요. 이외에도 컬럼에 팁 좀 알려주세요
  • column
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답변 3
  • 답변

    조윤환님의 답변

    아마도 실리카겔에 물질을 흡착시킨 후 컬럼 상단에 언고 분리를 시작하는 dry loading 방법을 말씀하시는 것 같습니다.

    보통 전개액에 화합물이 잘 녹지 않을 때 많이 사용하는 방법인데, 눈사람처럼 붙어 있는 상태라면 분리가 좀 힘들어 보입니다. 용해도 때문에 분리띠가 길게 끌리면서 겹치기 쉽기 때문이죠.

    방법은 이렇습니다. 로딩 샘플량에 약 10~20배 정도의 실리카겔과 샘플을 녹인 용액과 함께 을 rbf에 넣고 천천히 농축합니다. 이렇게 하면 샘플이 실리카겔에 코팅된 상태가 됩니다. 이것을 컬럼 상단에 잘 올리면 됩니다.

    나머지 과정은 일반 컬럼과 같습니다. 
    아마도 실리카겔에 물질을 흡착시킨 후 컬럼 상단에 언고 분리를 시작하는 dry loading 방법을 말씀하시는 것 같습니다.

    보통 전개액에 화합물이 잘 녹지 않을 때 많이 사용하는 방법인데, 눈사람처럼 붙어 있는 상태라면 분리가 좀 힘들어 보입니다. 용해도 때문에 분리띠가 길게 끌리면서 겹치기 쉽기 때문이죠.

    방법은 이렇습니다. 로딩 샘플량에 약 10~20배 정도의 실리카겔과 샘플을 녹인 용액과 함께 을 rbf에 넣고 천천히 농축합니다. 이렇게 하면 샘플이 실리카겔에 코팅된 상태가 됩니다. 이것을 컬럼 상단에 잘 올리면 됩니다.

    나머지 과정은 일반 컬럼과 같습니다. 
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  • 답변

    김동현님의 답변

    우선 잘 녹는 용매에 녹여서 컬럼 벽면을 통하여 최대한 균일하게 로딩시킨 후에 전개 용매를 0.5cm 정도씩 채워 내려보내고를 2-3번 정도 반복하면 어느 정도 스타팅 라인을 맞출 수 있습니다. 아니면 앞서 말씀하신 분과 같이 고정상에 코팅하여 전개하는 방법도 한 방법이구요.
    우선 잘 녹는 용매에 녹여서 컬럼 벽면을 통하여 최대한 균일하게 로딩시킨 후에 전개 용매를 0.5cm 정도씩 채워 내려보내고를 2-3번 정도 반복하면 어느 정도 스타팅 라인을 맞출 수 있습니다. 아니면 앞서 말씀하신 분과 같이 고정상에 코팅하여 전개하는 방법도 한 방법이구요.
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  • 답변

    김성수님의 답변

    로딩 샘플량에 약 10~20배 정도의 실리카겔과 샘플을 녹인 용액과 함께 을 rbf에 넣고 천천히 농축합니다. 이렇게 하면 샘플이 실리카겔에 코팅된 상태가 됩니다. 이것을 컬럼 상단에 잘 올리면 됩니다.
    로딩 샘플량에 약 10~20배 정도의 실리카겔과 샘플을 녹인 용액과 함께 을 rbf에 넣고 천천히 농축합니다. 이렇게 하면 샘플이 실리카겔에 코팅된 상태가 됩니다. 이것을 컬럼 상단에 잘 올리면 됩니다.
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