지식나눔

컬럼을 진행했을때 로딩선이 같이 나올때

실험에서 purification을 위해 컬럼을 진행하였는데 프로덕트의 RF값이 MC30에서 0.6정도입니다.

MC 5로 로딩해서 10, 15로 점차 높여서 컬럼을 진행하고 프로덕트만 분리해내었는데 아래의 다른스팟은 안나오지만 로딩선이 딸려 나오는 경우가 있는데 왜 이런지 알수있을까요?

패킹도 잘 되었고 로딩선도 일정하게 잘 되어있습니다.
실리카 패킹도 잘되어있고 프로덕트가 깨지거나 하지는 않았습니다.
  • purification
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답변 3
  • 답변

    조윤환님의 답변

    오버 로딩이 원인으로 추정됨니다 실릭카 양이 적은 경우 흔이 나타납니다
    오버 로딩이 원인으로 추정됨니다 실릭카 양이 적은 경우 흔이 나타납니다

    오버로딩이 실리카 양에 비해 로딩한 양이 많다는 건가요?
    혹시 원리?도 알 수 있을까요?

    컬럼크로마토그래피 기초 이론에 보면 Capacity factor 라는 것이 있습니다. retention factor 라고도 하는데 그 의미만 말씀드리면 일정량의 실리카겔로 분리할 수 있는 샘플의 양이 정해져 있다는 겁니다. 즉 실리카가 감당할 수 있는 양 이상으로 너무 많이 로딩을 하면 분리가 일어나지 않고섞여 나오게 된다는 거죠.

  • 답변

    김병관님의 답변

    컬럼할 때 로딩선이나 다른 spot 물질이 섞여나오는 경우는 여러 가지가 있습니다.
    로딩 시 많은 전개액을 사용하거나
    MC가 적은 양에서도 RF값이 크거나
    샘플양에 비해 관 두께가 얇아 샘플 라인이 두껍거나
    샘플양에 비해 관 길이가 짧거나
    사용한 전개액의 물질 RF 값이 크거나
    윗 분 답변대로 오버 로딩 등등 여러 가지 원인이 있을 수 있습니다.
    컬럼할 때 로딩선이나 다른 spot 물질이 섞여나오는 경우는 여러 가지가 있습니다.
    로딩 시 많은 전개액을 사용하거나
    MC가 적은 양에서도 RF값이 크거나
    샘플양에 비해 관 두께가 얇아 샘플 라인이 두껍거나
    샘플양에 비해 관 길이가 짧거나
    사용한 전개액의 물질 RF 값이 크거나
    윗 분 답변대로 오버 로딩 등등 여러 가지 원인이 있을 수 있습니다.
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  • 답변

    김성수님의 답변

    컬럼할 때 로딩선이나 다른 spot 물질이 섞여나오는 경우는 여러 가지가 있습니다.
    로딩 시 많은 전개액을 사용하거나
    MC가 적은 양에서도 RF값이 크거나
    샘플양에 비해 관 두께가 얇아 샘플 라인이 두껍거나
    샘플양에 비해 관 길이가 짧거나
    사용한 전개액의 물질 RF 값이 크거나
    윗 분 답변대로 오버 로딩 등등 여러 가지 원인이 있을 수 있습니다.
    컬럼할 때 로딩선이나 다른 spot 물질이 섞여나오는 경우는 여러 가지가 있습니다.
    로딩 시 많은 전개액을 사용하거나
    MC가 적은 양에서도 RF값이 크거나
    샘플양에 비해 관 두께가 얇아 샘플 라인이 두껍거나
    샘플양에 비해 관 길이가 짧거나
    사용한 전개액의 물질 RF 값이 크거나
    윗 분 답변대로 오버 로딩 등등 여러 가지 원인이 있을 수 있습니다.
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