2018-10-29
org.kosen.entty.User@26ed8bcc
성경주(skj)
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뇌 조직샘플 (frozen section)을 이용해서 멀티 염색을 주로 합니다.
신경줄기세포 증식률을 확인시 BrdU를 복강주사 후 시간을 나누어 희생하여 샘플을 준비합니다.
BrdU 안티바디 침투를 용이 하게 하기 위해 Hcl을 처리하는데요 이 부분때문에 더블 (stem, neuronal, glia cell) 염색을 할 때는 조직에 손상이 가는거 같아 형광 이미지 상태가 좋지 않습니다.
유사한 증식 마커 (edu, cldu)로 복강 주사 후 염색을 할 때 몇몇 프로토콜을 보니 hcl 처리과정을 하지 않아도 되는 프로토콜이 있던데요. (Optional Hcl 처리) 이 염색방법을 사용해 본적이 있는분의 조언 부탁드립니다. (hcl 처리 과정을 하지 않아도 증식되는 세포 염색이 잘되는 부분)
신경줄기세포 증식률을 확인시 BrdU를 복강주사 후 시간을 나누어 희생하여 샘플을 준비합니다.
BrdU 안티바디 침투를 용이 하게 하기 위해 Hcl을 처리하는데요 이 부분때문에 더블 (stem, neuronal, glia cell) 염색을 할 때는 조직에 손상이 가는거 같아 형광 이미지 상태가 좋지 않습니다.
유사한 증식 마커 (edu, cldu)로 복강 주사 후 염색을 할 때 몇몇 프로토콜을 보니 hcl 처리과정을 하지 않아도 되는 프로토콜이 있던데요. (Optional Hcl 처리) 이 염색방법을 사용해 본적이 있는분의 조언 부탁드립니다. (hcl 처리 과정을 하지 않아도 증식되는 세포 염색이 잘되는 부분)
- 5-Bromo-2′-deoxyuridine (BrdU)
- 5-Chloro-2′-deoxyuridine (CldU)
- 5-ethynyl-2_-deoxyuridine (EdU)
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 1
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답변
김형택님의 답변
2019-03-06- 0
Tuj1, GFAP, Nestin 이런 마커를 사용해서 염색을 진행하실텐데요. 전 in vitro 실험만 해봐서 옆 랩에 물어봤더니, 자기들은 hcl처리를 하지 않고 염색을 진행하고, 너무 안나오는 경우에만 hcl을 처리한다고 합니다. 처리 없이 염색 한번 해보세요!