지식나눔

secretome Mass Spectrometry Proteomic Analysis

특정 조직에서 세포를 추출해 배양을 한 후 세포가 어느정도 자라면 serum free 상태로 미디어 체인지 없이 3일정도 세포 배양 후 media를 Macrosep® Advance Centrifugal Devices (pall corporation, MAP100C37)를 이용하여 농축 합니다. 논문을 보면 농축만으로도 EXOSOME이라고 표현안 논문이 있지만 이 상태에서 EXOSOME ISOLATION KIT (SBI system bio.,)로 액소솜을 다시 분리 하였습니다. 엑소좀 표지자로 알려져있는 마커로 확인도 하였습니다. 
이 조건에서 세포에 자극을 준 후 엑소좀의 효과를 확인한 상태입니다. 여기서 도움이 필요한 부분은 프로테오믹스 기반으로 엑소좀의 특성을 확인하고 싶은데 샘플을 전달할때 아무리 키트로 분리를 하였더라도 이것은 순수한 단백질은 아니라 여러가지물질들이 믹스되었을 거 같은데 이런 문제점을 해결하는 방법을 아는 경험자분이나 프로테오믹스 의뢰할 업체를 아시는분은 소개 해주시면 많은 도움이 될거 같습니다. 
PS ; SBI와 이바이오젠 업체는 문의를 한 상태고 아직 답이 없습니다.
 
  • EXOSOME
  • 질량분석법
  • 단백질 집합체 분석
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 2
  • 답변

    장세호님의 답변

    '제노마인'이라는 업체 한 번 문의해 보시기 바랍니다.
    '제노마인'이라는 업체 한 번 문의해 보시기 바랍니다.
    성경주(skj) 2019-10-24

    좋은 정보 감사드립니다.

  • 답변

    이상후님의 답변

    Exosome 분리 키트를 이용하면 표적 단백질을 포함한 단백질류를 분리할 수 있습니다.
    그리고 LC-ESI-MS/MS 등의 고감도 분석기기로 표적 단백질들을 선택적으로 정량분석할 수 있습니다. 첨부자료 참고해 보시기 바랍니다.
    Exosome 분리 키트를 이용하면 표적 단백질을 포함한 단백질류를 분리할 수 있습니다.
    그리고 LC-ESI-MS/MS 등의 고감도 분석기기로 표적 단백질들을 선택적으로 정량분석할 수 있습니다. 첨부자료 참고해 보시기 바랍니다.
    성경주(skj) 2019-11-11

    좋은정보 감사합니다