2020-10-11
org.kosen.entty.User@68b39738
손영옥(sounagi1)
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안녕하세요? -70도에 보관중인 전혈이 있습니다. 이걸로 혈청 분리해서 cytokine 측정 가능할까요? 경험 있으신분 답변 부탁드립니다.
- 전혈
- 혈청
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답변 6
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답변
이상후님의 답변
2020-10-12- 5
전혈에서 채혈후에 가능하면 즉시 혈장이나 혈청으로 분리 한 후, 이 혈장/혈청을 -70도에 보관했다면 cytokine 측정에 문제는 없을 것 같으나, 전혈 자체를 그대로 -70도 보관후에 해동하게 되면 hemolysis(적혈구 파괴)가 일어나서 깨끗하게 분리가 안됩니다. 용혈된 혈액을 최소 20분 이상 원심분리후에 supernatant층을 샘플링해서 cytokine 측정해 보시기 바랍니다. -
답변
장성재님의 답변
2020-10-13- 3
위 답변자 말씀대로 분리 후 동결하지 않은 동결 혈액에서 혈청만을 분리하는 것은 쉽지 않습니다.
하지만, 모든 시료가 같은 조건에서 혈액을 동결한 경우 예로써 대조군과 실험군 사이의 cytokine 정량값의 비교가 아니라 상대적인 비교라면, 동일 조건에서 해동-원심분리 후 cytokine을 측정함으로써 (물론 개체 간의 차이 등 기준값 설정이 중요하겠지요) 결과를 해석할 수는 있을 듯 합니다.
앞으론 혈액 동결 보관 시 성분별로 분리해서 보관하도록 하세요. -
답변
김헌성님의 답변
2020-10-21- 3
전혈을 체혈한 직후라던지 아니면 냉장보관한 상테에서 혈장이나 혈청분리를 하는 것이 좋습니다.
그리고 그 분리한 혈장이나 혈청을 냉동보관하는 것이 좋습니다.
전혈은 -70도에서 보관하면 혈액내 세포들이 터져서 혈장이나 혈청이 오염될 가능성이 많습니다.
혈액 동결 보관 시 성분별로 분리해서 보관하시는 것이 다른 실험을 하시는데 좋을것 같습니다. -
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윤지숙님의 답변
2020-10-12- 2
전혈은 plasma, serum 으로 분리한다음 냉동보관 해서 사용했었는데, 전혈 전체를 보관한 적은 없네요. -
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김형택님의 답변
2020-10-28- 1
앞의 다른 분들과 같은 의견입니다. 가장 좋은 방법은 전혈 샘플을 얻으신 후 바로 분리를 하시는 것이 가장 좋습니다. 분리를 할때도 4도씨의 온도에서 분리하는 것을 추천 드립니다.
안타깝지만 다시 진행하시는 것을 추천 드립니다. -
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박애리님의 답변
2020-11-30- 0
hemolysis 안되게 조심해서 실험하셔야 ELISA 결과가 잘 나옵니다 참고하세요