2007-08-16
org.kosen.entty.User@2dc04e49
박성률(psrgroove)
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assay에 관심이 있는 학부생입니다.
논문을 읽다보니 fluorescence polarization가 나오더군요
이것에 근거한 protease assay를 사용하는 것 같은데
이것에 내용이 자세히 언급되있지않아 전반적인 이해가 어렵습니다.
부탁드립니다
- fluorescence
- polarization
- assay
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각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
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답변 1
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답변
이호진님의 답변
2007-08-17- 0
형광 분광기를 이용한 실험은 생물 및 화학 분야에서 많이 이용됩니다. 응용 분야가 매우 넓기 때문에 assay 부분만을 말씀드리겠습니다. 단백질과 펩타이드 (또는 화합물)의 상호작용의 경우 형광 분광기로 분석할 수 있는데.. 형광 물질을 펩타이드나 단백질에 도입한 후에 형광의 세기를 관찰하거나 polarization 또는 anisotropy 를 관찰합니다. polarization 이나 anisotropy 를 관찰할 때는 기기 상에서는 자동으로(요즘 사용하는 것들) 값을 읽을 수 있습니다. 이것의 의미하는 바는 형광물질을 도입한 분자의 모양과 관련이 있습니다. 형광 물질을 가지고 있는 펩타이드가 단백질에 결합하게 되면 이 분자는 마치 단백질의 일부처럼 되기 때문에 분자 모양이 바뀐 것처럼 기기상 인식됩니다. 그래서 polarization 값이 바뀝니다. 이렇게 값이 변하는 것을 바탕으로 단백질-리간드 상호작용을 확인할 수 있고 정량화 할 수도 있습니다. 만일 리간드가 얼마나 세게 단백질에 결합하는지 알고 있다면, 단백질-형광물질을 도입한 펩타이드 혼합 물질을 만든 다음.. 단백질에 경쟁적으로 결합하는 화합물을 찾아낼 수 있습니다. 만일 화합물의 결합이 알려진 리간드보다 결합이 세면 polarization 또는 intensity가 바뀌게 됩니다. polarization에 대한 정의는 웹 사이에서 찾아보시요. 평행한 빛과 직각인 빛의 세기를 바탕으로 정의됩니다. 형광 분광기를 사용해 보면 훨씬 쉽게 원리를 이해할 수 있습니다.. >assay에 관심이 있는 학부생입니다. > >논문을 읽다보니 fluorescence polarization가 나오더군요 > >이것에 근거한 protease assay를 사용하는 것 같은데 > >이것에 내용이 자세히 언급되있지않아 전반적인 이해가 어렵습니다. > >부탁드립니다