지식나눔

α-glucosidase assay 에 대해 질문드리겠습니다.

갑작스레 α-glucosidase assay 를 하게 되었습니다. 조건은 sample : 10uM Enzyme : 1U/ml Substrate : 1mM 입니다. 위의 세 종류를 얼마씩 넣고 반응을 시켜야 하나요? 제가 하던 방법은 위 조건으로 시약을 만든 후 well plate 에 각각 sample : 10ul Enzyme : 50ul Substrate : 50ul 씩 넣고 반응을 시키는데요. 이 방법이 틀린건가요?
  • α-glucosidase assay
  • glucosidase
지식의 출발은 질문, 모든 지식의 완성은 답변! 
각 분야 한인연구자와 현업 전문가분들의 답변을 기다립니다.
답변 1
  • 답변

    지유미님의 답변

    >갑작스레 α-glucosidase assay 를 하게 되었습니다. > >조건은 sample : 10uM >Enzyme : 1U/ml >Substrate : 1mM 입니다. > >위의 세 종류를 얼마씩 넣고 반응을 시켜야 하나요? > > >제가 하던 방법은 위 조건으로 시약을 만든 후 well plate 에 > >각각 sample : 10ul >Enzyme : 50ul >Substrate : 50ul 씩 넣고 반응을 시키는데요. 이 방법이 틀린건가요? 위의 조건이 논문에 나와있다면 final concentration인 것 같습니다. 반응시키시는 전체부피를 알지 못해서;;; 만약에 전체부피가 200㎕인 경우에 기질은 4mM을 사용하시는것이 어떨까요? 효소와 나머지 시료의 농도도 결정하시면 양을 결정하기 쉬우실것 같은데요~ 또 시간이 남으시면 효소활성 테스트 해보심이 좋으실것 같아요~ 좋은 결과 있으시길 바래요~ 부족하지만 도움이 되셨으면 좋겠습니다.
    >갑작스레 α-glucosidase assay 를 하게 되었습니다. > >조건은 sample : 10uM >Enzyme : 1U/ml >Substrate : 1mM 입니다. > >위의 세 종류를 얼마씩 넣고 반응을 시켜야 하나요? > > >제가 하던 방법은 위 조건으로 시약을 만든 후 well plate 에 > >각각 sample : 10ul >Enzyme : 50ul >Substrate : 50ul 씩 넣고 반응을 시키는데요. 이 방법이 틀린건가요? 위의 조건이 논문에 나와있다면 final concentration인 것 같습니다. 반응시키시는 전체부피를 알지 못해서;;; 만약에 전체부피가 200㎕인 경우에 기질은 4mM을 사용하시는것이 어떨까요? 효소와 나머지 시료의 농도도 결정하시면 양을 결정하기 쉬우실것 같은데요~ 또 시간이 남으시면 효소활성 테스트 해보심이 좋으실것 같아요~ 좋은 결과 있으시길 바래요~ 부족하지만 도움이 되셨으면 좋겠습니다.
    등록된 댓글이 없습니다.