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Streptavidin의 웨스턴 분석에 biotin - anti biotin antibody 사용이 가능할까요

streptavidin을 발현시켜 이를 antibody로 검출하고자 하는데, 시판되고 있는 anti-streptavidin antibody의 immunogen 서열과 제가 갖고 있는 서열이 달라서 사용하기 어려울 것 같습니다. 그래서 생각한 것이, streptavidin과 biotin의 친화력을 이용하는 것인데요 streptavidin에 free biotin을 binding시킨 후 이를 anti-biotin antibody로 측정이 가능한지가 궁금합니다. anti-biotin antibody들의 매뉴얼을 보면 conjugated biotin과 결합하지, free biotin과는 결합을 하지 않는다고 나와 있던데요, streptavidin과 결합한 biotin을 이런 antibody로 과연 검출이 가능한지 선배님들의 경험담이나 생각을 듣고 싶습니다.
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    이용원님의 답변

    Invitrogen 이나 Cell Signaling 등의 회사에서 biotinylated HRP 를 판매하고 있습니다. 직접 사용해 본 경험은 없지만, 위와 같은 시약을 쓰면 streptavidin 검출이 가능할 것 같습니다. >streptavidin을 발현시켜 이를 antibody로 검출하고자 하는데, > >시판되고 있는 anti-streptavidin antibody의 immunogen 서열과 제가 갖고 있는 서열이 달라서 사용하기 어려울 것 같습니다. > >그래서 생각한 것이, streptavidin과 biotin의 친화력을 이용하는 것인데요 > > >streptavidin에 free biotin을 binding시킨 후 이를 anti-biotin antibody로 측정이 가능한지가 궁금합니다. > >anti-biotin antibody들의 매뉴얼을 보면 conjugated biotin과 결합하지, free biotin과는 결합을 하지 않는다고 나와 있던데요, > >streptavidin과 결합한 biotin을 이런 antibody로 과연 검출이 가능한지 선배님들의 경험담이나 생각을 듣고 싶습니다.
    Invitrogen 이나 Cell Signaling 등의 회사에서 biotinylated HRP 를 판매하고 있습니다. 직접 사용해 본 경험은 없지만, 위와 같은 시약을 쓰면 streptavidin 검출이 가능할 것 같습니다. >streptavidin을 발현시켜 이를 antibody로 검출하고자 하는데, > >시판되고 있는 anti-streptavidin antibody의 immunogen 서열과 제가 갖고 있는 서열이 달라서 사용하기 어려울 것 같습니다. > >그래서 생각한 것이, streptavidin과 biotin의 친화력을 이용하는 것인데요 > > >streptavidin에 free biotin을 binding시킨 후 이를 anti-biotin antibody로 측정이 가능한지가 궁금합니다. > >anti-biotin antibody들의 매뉴얼을 보면 conjugated biotin과 결합하지, free biotin과는 결합을 하지 않는다고 나와 있던데요, > >streptavidin과 결합한 biotin을 이런 antibody로 과연 검출이 가능한지 선배님들의 경험담이나 생각을 듣고 싶습니다.
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    전정용님의 답변

    http://www.biocompare.com/ProductListings.aspx?s=streptavidin&sp=311%2c1117&c=3194&types=1-0.1-0.1-0.1-0 Ab 찾는 사이트입니다. 여기서 보면 polyclonal Ab도 있습니다. 서열이 다르다고 하신거 보니 monoclonal Ab같은데 찾아보시고 맞는게 있으시면 사용해 보심이 어떨런지요. >streptavidin을 발현시켜 이를 antibody로 검출하고자 하는데, > >시판되고 있는 anti-streptavidin antibody의 immunogen 서열과 제가 갖고 있는 서열이 달라서 사용하기 어려울 것 같습니다. > >그래서 생각한 것이, streptavidin과 biotin의 친화력을 이용하는 것인데요 > > >streptavidin에 free biotin을 binding시킨 후 이를 anti-biotin antibody로 측정이 가능한지가 궁금합니다. > >anti-biotin antibody들의 매뉴얼을 보면 conjugated biotin과 결합하지, free biotin과는 결합을 하지 않는다고 나와 있던데요, > >streptavidin과 결합한 biotin을 이런 antibody로 과연 검출이 가능한지 선배님들의 경험담이나 생각을 듣고 싶습니다.
    http://www.biocompare.com/ProductListings.aspx?s=streptavidin&sp=311%2c1117&c=3194&types=1-0.1-0.1-0.1-0 Ab 찾는 사이트입니다. 여기서 보면 polyclonal Ab도 있습니다. 서열이 다르다고 하신거 보니 monoclonal Ab같은데 찾아보시고 맞는게 있으시면 사용해 보심이 어떨런지요. >streptavidin을 발현시켜 이를 antibody로 검출하고자 하는데, > >시판되고 있는 anti-streptavidin antibody의 immunogen 서열과 제가 갖고 있는 서열이 달라서 사용하기 어려울 것 같습니다. > >그래서 생각한 것이, streptavidin과 biotin의 친화력을 이용하는 것인데요 > > >streptavidin에 free biotin을 binding시킨 후 이를 anti-biotin antibody로 측정이 가능한지가 궁금합니다. > >anti-biotin antibody들의 매뉴얼을 보면 conjugated biotin과 결합하지, free biotin과는 결합을 하지 않는다고 나와 있던데요, > >streptavidin과 결합한 biotin을 이런 antibody로 과연 검출이 가능한지 선배님들의 경험담이나 생각을 듣고 싶습니다.
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