2009-08-18
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최경임(zzang1062)
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3T3-L1 cell을 이용하여 정제한 물질의 Adipogenesis와 Adipolysis를 확인하여 합니다. KIT의 protocol대로 실험도 하고, 논문을 찾아 거기에 맞게 실험하는데,
배지교환만 하면 cell이 뭉치고 떠 버립니다.
원인이 뭔지.... 몇번을 해도, cell 농도를 조정해서 해봐도 계속 그렇네요.ㅠㅠ
- Adipogenesis
- Adipolysis
- 3T3-L1
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답변 3
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답변
김정민님의 답변
2009-08-18- 0
>3T3-L1 cell을 이용하여 정제한 물질의 Adipogenesis와 Adipolysis를 확인하여 합니다. KIT의 protocol대로 실험도 하고, 논문을 찾아 거기에 맞게 실험하는데, >배지교환만 하면 cell이 뭉치고 떠 버립니다. >원인이 뭔지.... 몇번을 해도, cell 농도를 조정해서 해봐도 계속 그렇네요.ㅠㅠ 여러 원인이 있을수 있겠으며, cells의 농도도 바꾸어 seeding해 보았다고 했으며, 논문에서 제시된 배양조건과 differentiotion media로 실험해도 마찬가지이라면, 제 경험으로는, 새로이 stock된 cells을 새로 wake-up하고 진행하거나, 새로 구입 혹은 분양받아 wake-up하고 진행하는 것이 어떨까 합니다. 즉, cell passage number를 확인해 보세요. 지금 진행중인 cells이 pre-adipocyte의 상태가 아닐수 있습니다. -
답변
신동욱님의 답변
2009-08-25- 0
>3T3-L1 cell을 이용하여 정제한 물질의 Adipogenesis와 Adipolysis를 확인하여 합니다. KIT의 protocol대로 실험도 하고, 논문을 찾아 거기에 맞게 실험하는데, >배지교환만 하면 cell이 뭉치고 떠 버립니다. >원인이 뭔지.... 몇번을 해도, cell 농도를 조정해서 해봐도 계속 그렇네요.ㅠㅠ cell이 뭉치고 떠 버리는 상태라는 것은 세포 상태가 passage가 상당히 높던지, 즉 안좋은 상태입니다. 보통 건강한 지방세포의 경우, 분화가 될때까지 confluency가 80-90%되게 되면, 다소 뜨는 경향이 있긴 합니다만, 실험을 못할 정도는 아닙니다. 세포 농도는 낮추더라도 결국 지질 분해 실험이라든가 지방세포 분화 실험을 위해서는 일정 confluency를 유지해줘야 하므로, 좋은 방법은 아닙니다. 세포 교환이 가장 빠른 해결책이 아닌가 싶습니다 -
답변
신동욱님의 답변
2010-01-10- 0
>3T3-L1 cell을 이용하여 정제한 물질의 Adipogenesis와 Adipolysis를 확인하여 합니다. KIT의 protocol대로 실험도 하고, 논문을 찾아 거기에 맞게 실험하는데, >배지교환만 하면 cell이 뭉치고 떠 버립니다. >원인이 뭔지.... 몇번을 해도, cell 농도를 조정해서 해봐도 계속 그렇네요.ㅠㅠ 원인은, cell이 attached해야 되는 dish에 제대로 고정이 안되기 때문인데, 이런 경우는 세포의 passage가 너무 10이상이던지에서 나타나므로, 세포교환이 최우선일 듯 싶습니다