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지식나눔

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AmSo4 precipitation이 pH에 영향을 받을까요 ?

2010-09-28 org.kosen.entty.User@e54aa28 성다래(ekfo87)
  • 1
protein purification중에 궁금한점이 생겻습니다. AmSo4 precipitation할 때 pH에 영향을 받을까요 ? 혹, 낮은 PH나 높은 pH에서 Amso4가 잘녹거나 잘 녹지 않을까요 ? 궁금합니다 ~
  • AmSo4 precipitation
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답변 1
  • 답변

    조윤환님의 답변

    2010-09-29
    • 0
    단백질 정제시 NH4SO4을 사용하는 이유는 용해도가 높고, 가격이 싸며 단백질에 거의 무해하기 때문입니다. 포화 용액의 경우 pH가 대략 5~6 사이 입니다. NH4SO4의 경우 다른 염들과 달리 0도에서의 용해도나 실온에서의 용해도 차이가 거의 없습니다. 100ml당 70g 가량 녹거든요. NaCl이나 NH4Cl 등과 비교해도 용해도가 매우 높은 편입니다. 보통 단백질 용액 1 ml당 0.6~0.7g을 사용하므로 거의 포화용액에 가까운 농도가 되는 셈이죠. 용액의 pH에 따라 염의 용해도가 달라지는 것은 일반적인 현상입니다. 화학적으로 열역학 및 평형이론 등 복잡한 설명이 필요하므로 생략하겠습니다. 염석(salting out)을 이용해 단백질을 정제할 때 재현성 있는 결과를 얻으려면 단백질 용액의 농도, 온도, pH, 사용하는 염의 종류 등의 파라미터를 일정하게 유지해야 합니다. pH는 염의 용해도 뿐만 아니라 단백질의 안정성에도 영향을 미치는 중요한 파라미터임을 기억하시기 바랍니다.
    답변수정
    단백질 정제시 NH4SO4을 사용하는 이유는 용해도가 높고, 가격이 싸며 단백질에 거의 무해하기 때문입니다. 포화 용액의 경우 pH가 대략 5~6 사이 입니다. NH4SO4의 경우 다른 염들과 달리 0도에서의 용해도나 실온에서의 용해도 차이가 거의 없습니다. 100ml당 70g 가량 녹거든요. NaCl이나 NH4Cl 등과 비교해도 용해도가 매우 높은 편입니다. 보통 단백질 용액 1 ml당 0.6~0.7g을 사용하므로 거의 포화용액에 가까운 농도가 되는 셈이죠. 용액의 pH에 따라 염의 용해도가 달라지는 것은 일반적인 현상입니다. 화학적으로 열역학 및 평형이론 등 복잡한 설명이 필요하므로 생략하겠습니다. 염석(salting out)을 이용해 단백질을 정제할 때 재현성 있는 결과를 얻으려면 단백질 용액의 농도, 온도, pH, 사용하는 염의 종류 등의 파라미터를 일정하게 유지해야 합니다. pH는 염의 용해도 뿐만 아니라 단백질의 안정성에도 영향을 미치는 중요한 파라미터임을 기억하시기 바랍니다.
    성다래(ekfo87) 2012-01-11

    어떻게 이렇게 잘아세요 ? ㅎ 감사합니다 !!

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