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지식나눔

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LC-MS/MS 분석시 peak 문제

2014-02-05 org.kosen.entty.User@41395e3c 김윤정(yjkim11)
  • 1
LC-MS/MS 분석시 두 물질을 동시분석하는데 두 물질의 major mass 값으로 각 Q1, Q3를 잡았습니다. 그런데 LC 컬럼연결하여 분석을 해보니 한물질이 다른 물질의 mass 값에서도 peak를 보이고 있네요. 해결방법 아시는 분 좀 알려주세요. 이대로 분석을 해도 되는건지.. 어떻게 하는게 좋을지요.
  • LC-MS/MS
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답변 1
  • 답변

    이상후님의 답변

    2014-02-06
    • 0
    LC-MS/MS로 두 가지 물질을 동시 분석시에 종종 발생되는 현상입니다.
    특히 두 가지 물질이 구조적으로 유사한 구조를 갖을 경우, 종종 발생되는데, 하지만 구조적으로 유사성이 없더라도 이런 현상이 발생될 수 있습니다. 왜냐하면 LC-MS/MS에서 궁극적으로 모니터링(정량) 하는 이온이 Q3 ion (daugther ion/product ion)이기 때문입니다.

    질문자분의 경우에는, 만약 Q3 ion이 두 물질간에 다른 m/z 를 갖는다면, 두 물질중에 하나(A 물질)의 MRM 또는 SRM transition을 설정할 때, 다른 물질(B 물질)의 Q3 ion을 하나 더 추가로 설정한 후, A 물질을 모니터링했을 때, B물질에 해당되는 peak가 chromatogram상에 나오는지 확인하면 됩니다. 즉, A 물질만을 모니터링 했을때 B 물질에 해당되는 Q3 ion이 동일한 retention time에 나온다면 cross talk이 발생된다고 보시면 됩니다. 그러나 B 물질의 Q3 ion이 동일 retention time에 나오지 않으면 그대로 A와 B 물질을 각각 정량 분석을 진행해도 됩니다.
    만약 A 물질만을 모니터링 했을 때, B 물질에 해당되는 Q3 ion의 peak이 동일 시간대에 나오게 되면, product ion scan 또는 optimized fragmented ion 형성 분석(automatic)을 통해 A 물질(또는 B 물질)의 Q3 ion을 다른 ion의 m/z로 설정해야 됩니다.

    설명이 다소 복잡할 수 있는데, 결국 A 물질을 정량하는데 필요한 "m/z a ---> b" 과
    B 물질 정량에 필요한 "m/z c ---> d"을 모니터링 하여, b ion에 해당되는 time에 d ion이 해당되는 피크가 중첩이 된다면 cross talk 현상을 의심해야 됩니다. 이 현상의 확인은 상기 설명한 것 처럼 A 물질을 분석했을 때 B 물질의 Q3 ion이 동일 시간대에 나오는지 확인하면 됩니다. a와 b의 m/z는 다를 수 있지만 b와 d의 m/z는 같을 수 있기 때문입니다.
    답변수정
    LC-MS/MS로 두 가지 물질을 동시 분석시에 종종 발생되는 현상입니다.
    특히 두 가지 물질이 구조적으로 유사한 구조를 갖을 경우, 종종 발생되는데, 하지만 구조적으로 유사성이 없더라도 이런 현상이 발생될 수 있습니다. 왜냐하면 LC-MS/MS에서 궁극적으로 모니터링(정량) 하는 이온이 Q3 ion (daugther ion/product ion)이기 때문입니다.

    질문자분의 경우에는, 만약 Q3 ion이 두 물질간에 다른 m/z 를 갖는다면, 두 물질중에 하나(A 물질)의 MRM 또는 SRM transition을 설정할 때, 다른 물질(B 물질)의 Q3 ion을 하나 더 추가로 설정한 후, A 물질을 모니터링했을 때, B물질에 해당되는 peak가 chromatogram상에 나오는지 확인하면 됩니다. 즉, A 물질만을 모니터링 했을때 B 물질에 해당되는 Q3 ion이 동일한 retention time에 나온다면 cross talk이 발생된다고 보시면 됩니다. 그러나 B 물질의 Q3 ion이 동일 retention time에 나오지 않으면 그대로 A와 B 물질을 각각 정량 분석을 진행해도 됩니다.
    만약 A 물질만을 모니터링 했을 때, B 물질에 해당되는 Q3 ion의 peak이 동일 시간대에 나오게 되면, product ion scan 또는 optimized fragmented ion 형성 분석(automatic)을 통해 A 물질(또는 B 물질)의 Q3 ion을 다른 ion의 m/z로 설정해야 됩니다.

    설명이 다소 복잡할 수 있는데, 결국 A 물질을 정량하는데 필요한 "m/z a ---> b" 과
    B 물질 정량에 필요한 "m/z c ---> d"을 모니터링 하여, b ion에 해당되는 time에 d ion이 해당되는 피크가 중첩이 된다면 cross talk 현상을 의심해야 됩니다. 이 현상의 확인은 상기 설명한 것 처럼 A 물질을 분석했을 때 B 물질의 Q3 ion이 동일 시간대에 나오는지 확인하면 됩니다. a와 b의 m/z는 다를 수 있지만 b와 d의 m/z는 같을 수 있기 때문입니다.
    이상후(sprout30) 2014-03-17

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    김윤정(yjkim11) 2014-04-19

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