지식나눔

항산화 실험중에 xanthine/xanthine oxidase실험원리가 궁금합니다.

항산화 실험을 준비하고 있는데요. 실험원리가 너무나 궁금합니다. NBT가 어떠한 역활을 하는건지? 그리고 실험시 주의사항은 무엇인지도요. 꼭 잔틴과 NBT를 mixing해서 시약준비를 해야하는지도요.
  • superoxide radical
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답변 1
  • 답변

    신정규님의 답변

    > >항산화 실험을 준비하고 있는데요. >실험원리가 너무나 궁금합니다. >NBT가 어떠한 역활을 하는건지? 그리고 실험시 주의사항은 무엇인지도요. >꼭 잔틴과 NBT를 mixing해서 시약준비를 해야하는지도요. 제가 알기로는 Superoxide anion이 xanthine-xanthine oxidase에 의해 발생이 되는데 이 superoxide anion을 NBT(nitroblue tetrazolium)의 감소량으로 측정을 하게 됩니다. NBT는 superoxide를 흡수하는 시약으로 보라색으로 색깔의 변화를 가져오게 합니다(570nm 에서 측정). 일정 간격을 두고 일정 시간동안 흡광도를 측정해서 기울기를 구하면 superoxide anion과 NBT가 반응하는 속도를 알 수 있습니다. 다음 논문을 참조하시면 더욱 잘 아실 수 있을거라 생각됩니다. Spectrophotometric assay for superoxide dismutase based on the nitroblue tetrazolium reduction by glucose-glucose oxidase. Biochem Mol Biol Int. 1995 Jul;36(3):633-8
    > >항산화 실험을 준비하고 있는데요. >실험원리가 너무나 궁금합니다. >NBT가 어떠한 역활을 하는건지? 그리고 실험시 주의사항은 무엇인지도요. >꼭 잔틴과 NBT를 mixing해서 시약준비를 해야하는지도요. 제가 알기로는 Superoxide anion이 xanthine-xanthine oxidase에 의해 발생이 되는데 이 superoxide anion을 NBT(nitroblue tetrazolium)의 감소량으로 측정을 하게 됩니다. NBT는 superoxide를 흡수하는 시약으로 보라색으로 색깔의 변화를 가져오게 합니다(570nm 에서 측정). 일정 간격을 두고 일정 시간동안 흡광도를 측정해서 기울기를 구하면 superoxide anion과 NBT가 반응하는 속도를 알 수 있습니다. 다음 논문을 참조하시면 더욱 잘 아실 수 있을거라 생각됩니다. Spectrophotometric assay for superoxide dismutase based on the nitroblue tetrazolium reduction by glucose-glucose oxidase. Biochem Mol Biol Int. 1995 Jul;36(3):633-8
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